This content is Free Access.
Chapters
- 00:05Title
- 00:50Cloning of gRNAs into the CRISPER-concatemer Vector
- 03:40Assessing Success of Cloning by Restriction Digest
- 05:28Preparing Intestinal Organoids for Electroporation
- 08:08Electroporation
- 10:36Results: Successful Generation of CRISPER-concatemers and Electroporation of Intestinal Organoids
- 11:24Conlcusion
Bu protokol, CRISPR / Cas9 teknolojisini kullanarak çoklu gen nakavtları yaratmada özel olarak kullanılan bir kılavuz RNA konformemer vektörüne birden fazla tekli kılavuz RNA'yı klonlamak için gereken aşamaları açıklar. Bağırsak organoitlerinde çift nakavt üretimi bu yöntemin olası bir uygulaması olarak gösterilmiştir.
