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Procédé de repliement efficace et la Purification des chémorécepteurs Ligand Binding Domain
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JoVE 신문 생화학
Method for Efficient Refolding and Purification of Chemoreceptor Ligand Binding Domain
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Procédé de repliement efficace et la Purification des chémorécepteurs Ligand Binding Domain

DOI:
10.3791/57092-v

•

14:25 min

•

December 12, 2017

•

,
1Infection and Immunity Program,Monash Biomedicine Discovery Institute, 2Department of Microbiology,Monash University, 3Department of Biochemistry and Molecular Biology,Monash University

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:46Expression of His6-TIp3-LBD in E. coli
  • 02:29Isolation and Denaturation of Inclusion Bodies
  • 05:34Protein Refolding
  • 07:39Purification of His6-tagged Protein Using Immobilized Metal Ion Affinity Chromatogrphy
  • 08:49His6-tag Removal Using TEV Protease and Size-excluson Chromatography of Tlp3-LBD
  • 11:06Results: Expression, Refolding, and Purification of Tlp3-LBD
  • 12:41Conclusion

Summary

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Une procédure est présentée pour le repliement de la domaine de liaison du ligand périplasmique dCACHE de Campylobacter jejuni zone chémoréceptrice Tlp3 de corps d’inclusion et de la purification pour produire des quantités de milligramme de protéine.

Tags

ChemoreceptorLigand Binding DomainRefoldingPurificationInclusion BodiesE. ColiProtein ExpressionIPTG InductionCell LysisHomogenizationCentrifugationSDS-PAGEBuffer ExchangeSolubilizationProtein Purification

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