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高効率巻き戻しと受容体リガンド結合領域の浄化法

JoVE 신문
생화학

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JoVE 신문 생화학

Method for Efficient Refolding and Purification of Chemoreceptor Ligand Binding Domain

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高効率巻き戻しと受容体リガンド結合領域の浄化法

DOI:

10.3791/57092-v

•

14:25 min

•

December 12, 2017

•

Mayra A. Machuca², Anna Roujeinikova^2,3

¹Infection and Immunity Program,Monash Biomedicine Discovery Institute, ²Department of Microbiology,Monash University, ³Department of Biochemistry and Molecular Biology,Monash University

Chapters

00:05Title
00:46Expression of His₆-TIp3-LBD in E. coli
02:29Isolation and Denaturation of Inclusion Bodies
05:34Protein Refolding
07:39Purification of His₆-tagged Protein Using Immobilized Metal Ion Affinity Chromatogrphy
08:49His₆-tag Removal Using TEV Protease and Size-excluson Chromatography of Tlp3-LBD
11:06Results: Expression, Refolding, and Purification of Tlp3-LBD
12:41Conclusion

Summary

자동 번역

封入体、ミリグラム単位の微量のタンパク質を生成するための精製からカンピロバクター走 Tlp3 の dCACHE ペリプラズムリガンド結合ドメインの巻き戻しプロシージャが表示されます。

Tags

Keywords: Chemoreceptor Ligand Binding Domain Refolding Purification Inclusion Bodies E. Coli Protein Expression IPTG Induction Cell Lysis Homogenization Centrifugation SDS-PAGE Buffer Exchange Solubilization Protein Purification

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