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효율적인 Refolding 및 Chemoreceptor Ligand 바인딩 도메인의 정화 방법

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생화학

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JoVE 신문 생화학

Method for Efficient Refolding and Purification of Chemoreceptor Ligand Binding Domain

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효율적인 Refolding 및 Chemoreceptor Ligand 바인딩 도메인의 정화 방법

DOI:

10.3791/57092-v

•

14:25 min

•

December 12, 2017

•

Mayra A. Machuca², Anna Roujeinikova^2,3

¹Infection and Immunity Program,Monash Biomedicine Discovery Institute, ²Department of Microbiology,Monash University, ³Department of Biochemistry and Molecular Biology,Monash University

Chapters

00:05Title
00:46Expression of His₆-TIp3-LBD in E. coli
02:29Isolation and Denaturation of Inclusion Bodies
05:34Protein Refolding
07:39Purification of His₆-tagged Protein Using Immobilized Metal Ion Affinity Chromatogrphy
08:49His₆-tag Removal Using TEV Protease and Size-excluson Chromatography of Tlp3-LBD
11:06Results: Expression, Refolding, and Purification of Tlp3-LBD
12:41Conclusion

Summary

자동 번역

프로시저 refolding dCACHE periplasmic ligand 바인딩 도메인 포함 시체와 단백질의 밀리 그램 수량을 정화에서 Campylobacter jejuni chemoreceptor Tlp3의의 대 한 제공 됩니다.

Tags

Keywords: Chemoreceptor Ligand Binding Domain Refolding Purification Inclusion Bodies E. Coli Protein Expression IPTG Induction Cell Lysis Homogenization Centrifugation SDS-PAGE Buffer Exchange Solubilization Protein Purification

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