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Biochemistry

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JoVE Journal Biochemistry
PCR-Mutagenese, Klonierung, Expression, schnelle Proteinreinigungsprotokolle und Kristallisation des Wildtyps und der mutierten Formen der Tryptophan-Synthase
 
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PCR-Mutagenese, Klonierung, Expression, schnelle Proteinreinigungsprotokolle und Kristallisation des Wildtyps und der mutierten Formen der Tryptophan-Synthase

Article DOI: 10.3791/61839-v • 09:31 min • September 26th, 2020
September 26th, 2020 •
1, 2, 1, 2
1Department of Chemistry, University of California-Riverside, 2Department of Biochemistry, University of California-Riverside

챕터

요약
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Dieser Artikel stellt eine Reihe von aufeinanderfolgenden Methoden zur Expression und Reinigung von Salmonella typhimurium tryptophan synthase vor, die dieses Protokoll zu einem schnellen System zur Reinigung des Proteinkomplexes an einem Tag machen. Abgedeckte Methoden sind ortsgerichtete Mutagenese, Proteinexpression in Escherichia coli,Affinitätschromatographie, Gelfiltrationschromatographie und Kristallisation.

Tags

Biochemie Ausgabe 163 Tryptophansynthase rekombinantes Protein mutiertes Protein Proteinexpression Proteinreinigung Ammoniumsulfatfällung Größenausschlusschromatographie Proteinkristallisation
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