Summary

Infection sous-cutanée du Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline (SARM)

Published: February 09, 2011
doi:

Summary

La peau douce et murin modèle d'infection des tissus est utilisé pour évaluer la fonction de virulence de Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline (SARM) et les réponses immunologiques hôte. Ici, nous avons présenté un modèle d'infection sous-cutanée de la peau et les infections des tissus mous.

Abstract

Le SARM est une menace mondiale pour la santé publique, et la peau SARM et des tissus mous représentent désormais plus de la moitié de toutes les infections des tissus mous dans les États-Unis. Parmi les infections des tissus mous, la myosite, pyomyosite, et la fasciite nécrosante ont été de plus en plus signalés en association avec le SARM provenant de la communauté. Pour comprendre l'interaction entre le SARM et immunité de l'hôte conduisant à l'infection plus sévère, la disponibilité de modèles animaux est critique, permettant l'étude de l'hôte et facteurs bactériens. Plusieurs modèles d'infection ont été introduites afin d'évaluer la pathogenèse de S. aureus lors d'une infection cutanée superficielle. Ici, nous décrivons un modèle d'infection cutanée qui examine la peau, sous-cutanée, et de pathologies musculaires.

Protocol

1. Préparation de la SDRM de l'infection (deux jours avant l'infection) Inoculer une anse de SARM à partir d'une culture d'actions à une gélose au sang (gélose trypticase-soja (TSA)) la plaque. Vérifiez le phénotype hémolyse (une zone claire autour de chaque colonie) sur la plaque de gélose au sang. Choisissez une colonie qui a un phénotype hémolytique qui est compatible avec d'autres expériences. Inoculer la colonie dans 3 ml de bouillon Todd Hewi…

Discussion

  1. La peau douce et murin modèle d'infection des tissus est un outil puissant pour l'évaluation in vivo de virulence d'un pathogène. La pathogénicité de S. aureus dans les infections cutanées et des tissus mous peuvent varier en fonction d'un certain nombre de paramètres. Il s'agit notamment de taille de l'inoculum, la phase de croissance bactérienne, la profondeur de l'inoculation, l'âge des souris, et le fond génétique de la souris 7, 8. Lorsque l'on examine la …

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ce travail a été soutenu par une bourse de carrière Burroughs-Wellcome et par les Instituts nationaux de la santé accorde AI074832 au GY Liu.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
THB   VWR 95025-314  
DPBS   Invitrogen 21-031-CV  
1 ml syringe   BD 309602  
27G1/2 needle   BD 305109  
Sheep Blood Agar (TSA)   VWR 90004-328  

Referências

  1. Ahn, J. Y., Song, J. Y., Yun, Y. S., Jeong, G., Choi, I. S. Protection of Staphylococcus aureus-infected septic mice by suppression of early acute inflammation and enhanced antimicrobial activity by ginsan. FEMS Immunol Med Microbiol. 46, 187-197 (2006).
  2. Girish, V., Vijayalakshmi, A. Affordable image analysis using NIH Image/ImageJ. Indian J Cancer. 41, 47-47 (2004).
  3. Hahn, B. L., Onunkwo, C. C., Watts, C. J., Sohnle, P. G. Systemic dissemination and cutaneous damage in a mouse model of staphylococcal skin infections. Microb Pathog. 47, 16-23 (2009).
  4. Hruz, P., Zinkernagel, A. S., Jenikova, G., Botwin, G. J., Hugot, J. P., Karin, M., Nizet, V., Eckmann, L. NOD2 contributes to cutaneous defense against Staphylococcus aureus through alpha-toxin-dependent innate immune activation. Proc Natl Acad Sci U S A. 106, 12873-12878 (2009).
  5. Ji, Y., Zhang, B., Van, S. F., Horn, P. W. a. r. r. e. n., Woodnutt, G., Burnham, M. K., Rosenberg, M. Identification of critical staphylococcal genes using conditional phenotypes generated by antisense RNA. Science. 293, 2266-2269 (2001).
  6. Somerville, G. A., Beres, S. B., Fitzgerald, J. R., DeLeo, F. R., Cole, R. L., Hoff, J. S., Musser, J. M. In vitro serial passage of Staphylococcus aureus: changes in physiology, virulence factor production, and agr nucleotide sequence. J Bacteriol. 184, 1430-1437 (2002).
  7. Tseng, C. W., Kyme, P., Low, J., Rocha, M. A., Alsabeh, R., Miller, L. G., Otto, M., Arditi, M., Diep, B. A., Nizet, V., Doherty, T. M., Beenhouwer, D. O., Liu, G. Y. Staphylococcus aureus Panton-Valentine leukocidin contributes to inflammation and muscle tissue injury. PLoS One. 4, e6387-e6387 (2009).
  8. von Kockritz-Blickwede, M., Rohde, M., Oehmcke, S., Miller, L. S., Cheung, A. L., Herwald, H., Foster, S., Medina, E. Immunological mechanisms underlying the genetic predisposition to severe Staphylococcus aureus infection in the mouse model. Am J Pathol. 173, 1657-1668 (2008).
check_url/pt/2528?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Tseng, C. W., Sanchez-Martinez, M., Arruda, A., Liu, G. Y. Subcutaneous Infection of Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA). J. Vis. Exp. (48), e2528, doi:10.3791/2528 (2011).

View Video