Summary

Methicillin 내성 황색 포도상 구균 아리 어스의 피하 감염 (MRSA)

Published: February 09, 2011
doi:

Summary

Murine 피부와 부드러운 조직 감염 모델은 methicillin 내성 포도상 구균 (MRSA) 및 호스트 면역 응답의 독성 기능을 평가하기위한 활용합니다. 여기, 우리는 피부와 부드러운 조직 감염 피하 감염 모델을 소개하고 있습니다.

Abstract

MRSA는 공중 보건에 대한 세계적인 위협이며, MRSA 피부와 부드러운 조직 감염은 이제 더 미국에있는 모든 소프트 조직 감염의 절반 이상을 차지하고있다. 소프트 조직 감염 가운데, myositis, pyomyositis 및 염 괴사는 점차 MRSA가 지역 사회에서 발생하는과 공동으로보고되었습니다. MRSA 더 심각한 감염으로 이어지는 호스트 면역 간의 상호 작용을 이해하기 위해서는, 동물 모델의 가용성은 호스트 및 세균성 요인의 연구를 허용, 중요합니다. 여러 감염 모델은 S.의 pathogenesis을 평가하기 위해 도입되었습니다 표면 피부 감염 동안 구균. 여기, 우리는 피부, 피하 및 근육 pathologies을 검사 피하 감염 모델을 설명합니다.

Protocol

1. 감염 MRSA를 (감염하기 전에 이틀) 준비 주식 문화의 혈액 한천 (Trypticase의 소이 아가르 (TSA)) 접시에 MRSA의 loopful의 예방. 혈액 한천 플레이트에 용혈의 표현형 (각 콜로니 주위에 맑은 구역)을 확인하시기 바랍니다. 다른 실험과 일치하는 용혈성 표현형을 가진 식민지를 선택하십시오. 15 ML 스냅 덮인 관에서, appropriated 항생제 필요한 경우와 3 ML 토드 휴이트 맛을 (THB…

Discussion

  1. murine 피부와 부드러운 조직 감염 모델은 병원체의 생체내 독성 평가에 대한 강력한 도구입니다. S.의 pathogenicity 피부와 부드러운 조직 감염의 구균이 매개 변수의 수에 따라 달라질 수 있습니다. 이들은 inoculum 크기, 세균성 성장 단계 접종의 깊이, 마우스의 연령, 및 마우스 유전 배경에 7, 8을 포함합니다. 이 모델을 사용하여 독성 기능을 검사하면 결과가 일치하는지 확인?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 작품은 버로스 – 웰컴 경력 수상 및 GY 리우에 보건 부여 AI074832 국립 연구소에 의해 지원되었다.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
THB   VWR 95025-314  
DPBS   Invitrogen 21-031-CV  
1 ml syringe   BD 309602  
27G1/2 needle   BD 305109  
Sheep Blood Agar (TSA)   VWR 90004-328  

Referências

  1. Ahn, J. Y., Song, J. Y., Yun, Y. S., Jeong, G., Choi, I. S. Protection of Staphylococcus aureus-infected septic mice by suppression of early acute inflammation and enhanced antimicrobial activity by ginsan. FEMS Immunol Med Microbiol. 46, 187-197 (2006).
  2. Girish, V., Vijayalakshmi, A. Affordable image analysis using NIH Image/ImageJ. Indian J Cancer. 41, 47-47 (2004).
  3. Hahn, B. L., Onunkwo, C. C., Watts, C. J., Sohnle, P. G. Systemic dissemination and cutaneous damage in a mouse model of staphylococcal skin infections. Microb Pathog. 47, 16-23 (2009).
  4. Hruz, P., Zinkernagel, A. S., Jenikova, G., Botwin, G. J., Hugot, J. P., Karin, M., Nizet, V., Eckmann, L. NOD2 contributes to cutaneous defense against Staphylococcus aureus through alpha-toxin-dependent innate immune activation. Proc Natl Acad Sci U S A. 106, 12873-12878 (2009).
  5. Ji, Y., Zhang, B., Van, S. F., Horn, P. W. a. r. r. e. n., Woodnutt, G., Burnham, M. K., Rosenberg, M. Identification of critical staphylococcal genes using conditional phenotypes generated by antisense RNA. Science. 293, 2266-2269 (2001).
  6. Somerville, G. A., Beres, S. B., Fitzgerald, J. R., DeLeo, F. R., Cole, R. L., Hoff, J. S., Musser, J. M. In vitro serial passage of Staphylococcus aureus: changes in physiology, virulence factor production, and agr nucleotide sequence. J Bacteriol. 184, 1430-1437 (2002).
  7. Tseng, C. W., Kyme, P., Low, J., Rocha, M. A., Alsabeh, R., Miller, L. G., Otto, M., Arditi, M., Diep, B. A., Nizet, V., Doherty, T. M., Beenhouwer, D. O., Liu, G. Y. Staphylococcus aureus Panton-Valentine leukocidin contributes to inflammation and muscle tissue injury. PLoS One. 4, e6387-e6387 (2009).
  8. von Kockritz-Blickwede, M., Rohde, M., Oehmcke, S., Miller, L. S., Cheung, A. L., Herwald, H., Foster, S., Medina, E. Immunological mechanisms underlying the genetic predisposition to severe Staphylococcus aureus infection in the mouse model. Am J Pathol. 173, 1657-1668 (2008).
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Citar este artigo
Tseng, C. W., Sanchez-Martinez, M., Arruda, A., Liu, G. Y. Subcutaneous Infection of Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA). J. Vis. Exp. (48), e2528, doi:10.3791/2528 (2011).

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