Summary

シングルショウジョウバエ個眼の解剖とイメージング

Published: August 19, 2011
doi:

Summary

成人の使用の制限要因<em>ショウジョウバエ</em神経変性と細胞生物学を研究するために>目には細胞内プロセスの困難な画像です。我々は薬物療法と高度な画像処理の対象になることができる正真正銘の初代神経細胞培養を、生成する単一のommatidiumの複数形の解剖を説明します。

Abstract

ショウジョウバエでは神経科学研究に貴重な貢献をしているとので、その強力な遺伝学1の神経変性疾患のモデルとして広く用いられている。特にフライアイは、 ショウジョウバエの神経系の最もアクセスとライフなくても済む部分である、神経変性の研究のための選択の器官となっている。しかし、そのまま目の主な注意点は、神経変性の理解に重要であるようなオートファジーのダイナミクス2のようなイメージング細胞内のイベント、、で、ために色素の強い自家蛍光が、困難です。

我々は最近Dentatorubro核淡蒼球萎縮症(DRPLA)3、4のハエのモデルにおけるオートファジー機能障害の理解に不可欠であった単ommatidiumの複数形3の解剖と文化を使用しています。

我々は現在、劇的に神経変性のためのフライのモデルの可能性を拡大する可能性がある電気生理学的研究5日から適応このテクニックの包括的な説明(図1)、報告する。このメソッドは、画像細胞内イベントを生活し、視細胞(図2)に効果的な薬剤投与を監視するために適応させることができます。モザイクの技法6月8日と組み合わせて使用する場合、遺伝的に異なる細胞の応答は平行(図2)で検定することができる。

Protocol

1。 ショウジョウバエの網膜の解剖リン酸3ウェルガラススライドの1つのウェルを埋めるには、CO 2でハエを麻酔し(PBS 1X)緩衝生理食塩水、と。オスとメスの両方がこの実験に使用することができます。 ハエが麻酔したら、鉗子を使用して単一のフライをピックアップし、PBSの小さな皿にドロップします。 解剖スコープの下では、鉗子で口吻をピンチし?…

Discussion

ここで紹介する単一の個眼の解剖は、 ショウジョウバエの眼でモデル化された神経変性のようなプロセスは、約深い細胞生物学的情報の収集を可能にします。光受容ニューロンは、他のニューロンよりも簡単にアクセスでき、それら細胞質は生体内の神経変性を定量化するための多くのモデルで上手に使用される非常に同じ細胞では、特に大規模、および小胞のダイナミクスを…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

我々は議論のためにバーナードシャルーに感謝。この作品は、KCL生物医学学校によって資金を供給された。

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
Portable CO2 Dispenser Flystuff 59-150 Refills also available
DUMONT Tweezer No 5 AGAR Scientific T5034  
3-Well Glass Slide EMS 71561-01  
Micro scissors VWR HAMMHSB516-09  
Schneider’s Medium VWR 733-1663  
LysoTracker Red DND-99 Invitrogen L7528  
Superfrost Slides VWR 631-0108  
Vectashield with Dapi Vector Labs H-1200  
Coverslips VWR 631-1336  

Referências

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Citar este artigo
Volpi, V., Mackay, D., Fanto, M. Single Drosophila Ommatidium Dissection and Imaging. J. Vis. Exp. (54), e2882, doi:10.3791/2882 (2011).

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