Herbivores induite Volatiles Blueberry et intra-usine de signalisation
Summary
Une méthode push-pull pour la collecte des plantes volatils est décrite. La méthode permet une comparaison des composés volatils induite par l'alimentation des herbivores, le jasmonate de méthyle exogène, et les dommages mécaniques. Cette technique est également utilisée pour étudier la réponse volatiles de branches intactes à l'exposition aux composés volatils à partir de branches endommagées par des herbivores dans les plants de bleuets.
Abstract
Volatiles des plantes induite par les Herbivores (HIPVs) sont communément émis par les plantes, après 1,2 attentat herbivore. Ces HIPVs sont principalement réglementés par l'acide jasmonique hormones végétales défensives (JA) et ses dérivés méthyl jasmonate volatiles (MeJa) 3,4,5. Au cours des dernières décennies les chercheurs ont démontré que les trois HIPVs peut repousser ou attirer les herbivores, d'attirer les ennemis naturels des herbivores et, dans certains cas, ils peuvent induire ou de défense des plantes Premier avant l'attaque des herbivores. Dans un document récent 6, j'ai signalé que l'alimentation par des chenilles de la spongieuse, l'application exogène Meja, et les dommages mécaniques induisent des émissions de composés volatils à partir des plants de bleuets, quoique différemment. En outre, les succursales de répondre aux bleuets HIPVs émis par les branches voisines de la même plante en augmentant les niveaux de JA et la résistance aux herbivores (c'est à dire, les défenses des plantes directe), et par les émissions d'amorçage volatils (ie, les défenses des plantes indirecte). Similaires à trouverIngs ont été rapportés récemment pour armoise 7, 8 peupliers, et les haricots de Lima 9 ..
Ici, je décris une méthode push-pull pour la collecte de bleuets volatiles induits par des herbivores (spongieuse) l'alimentation, l'application exogène Meja, et les dommages mécaniques. L'unité de collecte volatile compose d'une chambre de 4 L de collecte volatiles, une guillotine 2-pièces, un système de livraison de l'air qui purifie l'air entrant, et un système d'aspiration relié à un piège rempli de Super-Q adsorbant pour recueillir volatiles 5,6,10 . Volatiles recueillies en Super-Q pièges sont élués avec du dichlorométhane, puis séparés et quantifiés à l'aide chromatographie en phase gazeuse (GC). Cette méthode de collecte volatile a été utilisé mon étude n 6 pour étudier la réponse volatiles de branches intactes à l'exposition aux composés volatils à partir de branches endommagées par des herbivores dans les plants de bleuets. Ces méthodes sont décrites ici. Brièvement, intact branches de bleuets sont exposés à HIPVs BOFM branches voisines dans la même usine. En utilisant les mêmes techniques décrites ci-dessus, les volatiles émises par les branches après une exposition à HIPVs sont recueillies et analysées.
Protocol
Discussion
Le push-pull appareil de collecte de volatiles décrit ici représente une méthode standard pour les collections headspace de volatiles des plantes. Cet appareil a été utilisé pour déterminer la réponse volatiles des feuilles de bleuets à l'herbivorie par les chenilles spongieuse et m'a aussi permis de fournir de nouvelles preuves du rôle de HIPVs dans les échanges intra-usine de signalisation.
Les résultats présentés ici montrent que l'alimentation chenille, exogène…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
L'auteur remercie Robert Holdcraft d'assistance technique. Cette étude a été financée en partie par une subvention de l'USDA CSREES spéciaux (2009-34155-19957) et les fonds de trappe (NJ08192).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Volatile collection chambers | Analytical Research Systems, Inc. | VCC-G6X12DT-1P | Gainesville, FL |
| Air compressor, 20 gal, oil free, 2 hp | Westward | 3JR71 | Sold by Grainger, Inc. |
| Air delivery system | Analytical Research Systems, Inc. | VCS-ADS-4AFM4C | Gainesville, FL |
| Air collection system | Analytical Research Systems, Inc. | VCS-MVCS-4CX1P | Gainesville, FL |
| Vacuum pump 100-150V, ¼ hp | Gast Manufacturing, Inc. | 4F740 | Sold by Grainger, Inc. |
| Methyl jasmonate | Sigma-Aldrich | J2500 | St. Louis, MO |
| Tween-20 | Sigma-Aldrich | 93773 | St. Louis, MO |
| Rhodamine-B | Sigma-Aldrich | St. Louis, MO | |
| Plastic spray bottles, 2 oz | Setco Inc. | Cranbury, NJ | |
| Spun polyester sleeves | Rockingham Opportunities Corp. | Reidsville, NC | |
| Super-Q volatile collection traps | Analytical Research Systems, Inc. | VCT-1/4X3-SPQ | Gainesville, FL |
| Scion Image Software | Scion Corporation | Frederick, MD | |
| Dichloromethane | Sigma-Aldrich | 270997 | St. Louis, MO |
| Gas chromatograph HP 6890 | Hewlett Packard | ||
| Gas chromatograph Varian 3400 | Varian | ||
| n-octane | Sigma-Aldrich | 296988 | St. Louis, MO |
| Mass spectrometer MAT 8230 | Finnigan | San Jose, CA | |
| HP-1 GC column | Agilent Technologies | Palo Alto, CA |
|
| MDN-5S GC column | Supelco, Inc. | Bellefonte, PA |
Referências
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