Summary

Otobur bağlı Blueberry uçucu ve Intra-bitki Sinyalleşme

Published: December 18, 2011
doi:

Summary

Bitki uçucu toplamak için bir itme-çekme yöntemi açıklanmıştır. Bu yöntem, otçul beslenme, eksojen metil jasmonate ve mekanik hasar kaynaklanan uçucu bir karşılaştırma için sağlar. Bu teknik aynı zamanda yaban mersini bitkileri içinde hasarlı dalları otobur uçucu için maruz hasarsız şube uçucu yanıtını araştırmak için kullanılır.

Abstract

Otobur kaynaklı bitki uçucu (HIPVs) yaygın otobur saldırı 1,2 sonra bitkilerden yayılan. Bu HIPVs ağırlıklı olarak savunma bitki hormonu Jasmonik asit (JA) ve uçucu türev metil jasmonate (Meja) 3,4,5 tarafından düzenlenir. Son 3 yılda araştırmacılar içinde püskürtmek veya HIPVs çekmek otobur, otçul doğal düşmanları çekmek ve bazı durumlarda otobur saldırı öncesinde tetikleyebilir ya da asal bitki savunma olduğunun belgelenmesi var. Son bir kağıt 6, çingene güvesi tırtıllar, eksojen Meja uygulama, ve mekanik hasar farklı olsa da, yaban mersini bitkiler uçucu emisyon neden bu besleme bildirdi . Buna ek olarak, yaban mersini dalları, JA ve otobur (yani, doğrudan bitki savunması) direnç seviyelerini artırarak komşu aynı bitki dalları yayılan HIPVs ve priming uçucu emisyon (yani, dolaylı bitki savunmaları). Bulmak Benzerbulgular adaçayı 7, kavak 8 ve lima fasulye 9 bildirilmiştir ..

Burada, otobur (çingene güvesi) beslenme, eksojen Meja uygulaması ve mekanik hasarlara yol açtığı yaban mersini uçucu toplamak için bir itme-çekme yöntemi açıklar. Uçucu toplama ünitesi, 4 L uçucu toplama odası, 2-parçalı giyotin gelen hava arındırır bir hava dağıtım sistemi ve uçucu 5,6,10 toplamak için Super-Q adsorban ile dolu bir tuzak bağlı bir vakum sistemi oluşur . Super-Q tuzakları toplanan uçucu diklorometan ile yıkandı ve sonra ayrılmış ve Gaz Kromatografisi (GC) kullanılarak kantitatif. Bu uçucu toplama yöntemi, yaban mersini bitkileri içinde hasarlı dalları otobur hasarsız şube uçucu için maruz uçucu yanıt araştırmak için kullanılır n benim çalışma 6 oldu . Bu yöntemler aşağıda açıklanmıştır. Kısaca, hasarsız yaban mersini dalları fro HIPVs maruzm aynı tesis içinde komşu dalları. Yukarıda açıklanan aynı teknikleri kullanarak, HIPVs için maruz kaldıktan sonra dallarından yayılan uçucu toplanır ve analiz edilir.

Protocol

1. Uçucu Yerel indüksiyon: otobur zarar Yaban mersini bitkilerin iki şubesi spun polyester kol ile Torbalı. Altı çingene güvesi tırtıllar (2. -3 üncü instars) çanta içine yerleştirilen ve uçucu toplama öncesinde 2 gün boyunca bitkiler üzerinde beslemek için izin verilir. Kontrol bitkiler herhangi bir tırtıllar almıyorsunuz. Uçucu emisyonları gün 3 (Şekil 1) (protokol # 7) aşağıda anlatıldığı gibi toplanır. Polyester k…

Discussion

Burada anlatılan, itme-çekme uçucu toplama cihazı bitki uçucu headspace koleksiyonları için standart bir yöntem temsil. Bu cihaz herbivory çingene güvesi tırtıllar tarafından yaban mersini yapraklarından uçucu yanıt belirlemek için kullanılan ve aynı zamanda tesis içi sinyalizasyon HIPVs rolü için yeni kanıtlar sunmak için bana izin verildi.

Sonuçları bu tırtıl beslenme, Eksojen olarak uygulanan Meja burada sunulan ve mekanik yaralama farklı olsa da, hasar yerind…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazar Robert Holdcraft teknik destek için teşekkür eder. Bu çalışmada, USDA CSREES Özel Grant (2009-34155-19957) ve hatch fonları (NJ08192) tarafından kısmen finanse edildi.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Volatile collection chambers Analytical Research Systems, Inc. VCC-G6X12DT-1P Gainesville, FL
Air compressor, 20 gal, oil free, 2 hp Westward 3JR71 Sold by Grainger, Inc.
Air delivery system Analytical Research Systems, Inc. VCS-ADS-4AFM4C Gainesville, FL
Air collection system Analytical Research Systems, Inc. VCS-MVCS-4CX1P Gainesville, FL
Vacuum pump 100-150V, ¼ hp Gast Manufacturing, Inc. 4F740 Sold by Grainger, Inc.
Methyl jasmonate Sigma-Aldrich J2500 St. Louis, MO
Tween-20 Sigma-Aldrich 93773 St. Louis, MO
Rhodamine-B Sigma-Aldrich   St. Louis, MO
Plastic spray bottles, 2 oz Setco Inc.   Cranbury, NJ
Spun polyester sleeves Rockingham Opportunities Corp.   Reidsville, NC
Super-Q volatile collection traps Analytical Research Systems, Inc. VCT-1/4X3-SPQ Gainesville, FL
Scion Image Software Scion Corporation   Frederick, MD
Dichloromethane Sigma-Aldrich 270997  St. Louis, MO
Gas chromatograph HP 6890 Hewlett Packard    
Gas chromatograph Varian 3400 Varian    
n-octane Sigma-Aldrich 296988 St. Louis, MO
Mass spectrometer MAT 8230 Finnigan   San Jose, CA
HP-1 GC column Agilent Technologies   Palo Alto,
CA
MDN-5S GC column Supelco, Inc.   Bellefonte, PA

Referências

  1. Dicke, M., Van Loon, J. J. A. Multitrophic effects of herbivore-induced plant volatiles in an evolutionary context. Entomol. Exp. Appl. 97, 237-237 (2000).
  2. Mumm, R., Dicke, M. Variation in natural plant products and the attraction of bodyguards involved in indirect plant defense. Can. J. Zool. 88, 628-628 (2010).
  3. Hopke, J. Herbivore-induced volatiles: the emission of acyclic homoterpenes from leaves of Phaseolus lunatus and Zea mays can be triggered by a β-glucosidase and jasmonic acid. FEBS Lett. 352, 146-146 (1994).
  4. Rodriguez-Saona, C. Behavioral and electrophysiological responses of the emerald ash borer, Agrilus planipennis, to induced volatiles of Manchurian ash, Fraxinus mandshurica. Chemoecology. 16, 75-75 (2006).
  5. Rodriguez-Saona, C. Herbivore induced volatiles in the perennial shrub, Vaccinium corymbosum, and their role in inter-branch signaling. J. Chem. Ecol. 35, 163-163 (2009).
  6. Karban, R. Damage-induced resistance in sagebrush: volatiles are key to intra- and interplant communication. Ecology. 87, 922-922 (2006).
  7. Frost, C. J. Within-plant signalling by volatiles overcomes vascular constraints on systemic signalling and primes responses against herbivores. Ecol. Lett. 10, 490-490 (2007).
  8. Heil, M., Bueno Silva, J. C. Within-plant signaling by volatiles leads to induction and priming of an indirect plant defense in nature. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 104, 5467-5467 (2007).
  9. Turlings, T. C. Exploitation of herbivore-induced plant odors by host-seeking parasitic wasps. Science. 250, 1251-1251 (1990).
  10. Makovic, I. Volatiles involved in the nonhost rejection of Fraxinus pennsylvanica by Lymantria dispar larvae. J. Agric. Food Chem. 44, 929-929 (1996).
check_url/pt/3440?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Rodriguez-Saona, C. R. Herbivore-induced Blueberry Volatiles and Intra-plant Signaling. J. Vis. Exp. (58), e3440, doi:10.3791/3440 (2011).

View Video