Summary

草食動物によって誘導されたブルーベリー揮発性物質とイントラ植物のシグナリング

Published: December 18, 2011
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Summary

植物の揮発性物質を収集するためのプッシュプルの方法が記載されている。方法は、草食動物の摂食、外因性のジャスモン酸メチル、及び機械的損傷によって誘導される揮発性成分の比較ができます。この手法はまた、ブルーベリー、植物内の草食動物で痛んだ枝から揮発成分への曝露に無傷の枝の揮発性の応答を調査するために使用されます。

Abstract

草食動物によって誘導された植物の揮発性物質(HIPVsは)一般的に草食動物の攻撃の1,2の後に植物から放出される。これらHIPVsは主に防御的な植物ホルモンであるジャスモン酸(JA)とその揮発性誘導体ジャスモン酸メチル(メジャ)3,4,5によって規制されている。過去30年間にわたって研究者がHIPVsが撃退するか誘致草食動物を、草食動物の天敵を誘致し、いくつかのケースで彼らは草食動物の攻撃の前に植物の防御を誘導または素数できることを文書化している。最近の論文6では、私は違うとはいえ、ブルーベリーの植物からの揮発性物質の放出を誘導マイマイガの幼虫、外因性メジャアプリケーション、および機械的損傷によってその餌を報告した。加えて、ブルーベリーの枝はJAと草食動物(すなわち、直接植物の防御)への抵抗のレベルを増加させることによって、同じ植物の隣接枝から放出さHIPVsに応答し、プライミング揮発性排出によって(すなわち、間接的な植物の防御)。見つける同様のイングスはヤマヨモギ7、ポプラ8、アオイマメ9の最近報告されている..

ここで、私は草食動物(マイマイガ)給餌、外因性メジャアプリケーション、および機械的損傷によって誘導されるブルーベリー揮発性物質を収集するためのプッシュプル方式を説明します。揮発収集ユニットは、4 L揮発収集チャンバー、2ピースのギロチン、入ってくる空気を浄化する空気供給システム、および揮発性物質5,6,10を収集するためにスーパーQ吸着剤を充填したトラップに接続された真空システムから構成されています。スーパー- Qトラップで収集された揮発性物質をジクロロメタンで溶出して分離し、ガスクロマトグラフィー(GC)を用いて定量されています。この揮発性の収集方法は、ブルーベリー、植物内の草食動物で痛んだ枝から揮発成分への曝露に無傷の枝の揮発性の応答を調査するために使用さnの私の研究は6した。これらのメソッドはここで説明されています。簡単に言えば、損傷していないブルーベリーの枝があちこちにHIPVsにさらされているmは、同じ工場内での分岐を隣接。上記と同じ技法を使用して、HIPVsへの曝露後の枝から放出される揮発性物質を収集し、分析されています。

Protocol

1。揮発性物質の局所誘導:草食動物の損傷ブルーベリー植物の二つの枝は、スパンポリエステルのスリーブにパックされます。 六マイマイガの幼虫(2回-3 回の齢期)はバッグの内側に配置し、揮発性のコレクションの前に2日間、植物を餌に許可されています。コントロール植物はどんな毛虫を受信しません。 揮発性排出量は、3日目…

Discussion

プッシュプル揮発回収装置は、植物の揮発成分のヘッドスペースのコレクションのための標準メソッドを表すここで説明する。この装置は、マイマイガの幼虫による食害にブルーベリーの葉の揮発性の応答を決定するために使用し、また私がイントラ植物のシグナル伝達におけるHIPVsの役割のための新たな証拠を提供させた。

結果は、その毛虫の摂食、外因的に適用され…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者は、技術支援のためのロバートHoldcraftに感謝。この研究は、米国農務省CSREES特別グラント(2009-34155-19957)とハッチ資金(NJ08192)の一部で賄われていた。

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Volatile collection chambers Analytical Research Systems, Inc. VCC-G6X12DT-1P Gainesville, FL
Air compressor, 20 gal, oil free, 2 hp Westward 3JR71 Sold by Grainger, Inc.
Air delivery system Analytical Research Systems, Inc. VCS-ADS-4AFM4C Gainesville, FL
Air collection system Analytical Research Systems, Inc. VCS-MVCS-4CX1P Gainesville, FL
Vacuum pump 100-150V, ¼ hp Gast Manufacturing, Inc. 4F740 Sold by Grainger, Inc.
Methyl jasmonate Sigma-Aldrich J2500 St. Louis, MO
Tween-20 Sigma-Aldrich 93773 St. Louis, MO
Rhodamine-B Sigma-Aldrich   St. Louis, MO
Plastic spray bottles, 2 oz Setco Inc.   Cranbury, NJ
Spun polyester sleeves Rockingham Opportunities Corp.   Reidsville, NC
Super-Q volatile collection traps Analytical Research Systems, Inc. VCT-1/4X3-SPQ Gainesville, FL
Scion Image Software Scion Corporation   Frederick, MD
Dichloromethane Sigma-Aldrich 270997  St. Louis, MO
Gas chromatograph HP 6890 Hewlett Packard    
Gas chromatograph Varian 3400 Varian    
n-octane Sigma-Aldrich 296988 St. Louis, MO
Mass spectrometer MAT 8230 Finnigan   San Jose, CA
HP-1 GC column Agilent Technologies   Palo Alto,
CA
MDN-5S GC column Supelco, Inc.   Bellefonte, PA

Referências

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Citar este artigo
Rodriguez-Saona, C. R. Herbivore-induced Blueberry Volatiles and Intra-plant Signaling. J. Vis. Exp. (58), e3440, doi:10.3791/3440 (2011).

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