يوصف أسلوب دفع سحب لجمع المواد المتطايرة النبات. الأسلوب يسمح للمقارنة بين المواد المتطايرة الناجمة عن التغذية عاشب ، jasmonate الخارجية الميثيل ، والأضرار الميكانيكية. كما تستخدم هذه التقنية للتحقيق في استجابة تقلبا من الفروع التالفة التعرض لالمتطايرة من فروع عاشب المتضررة داخل النباتات عنبية.
وتنبعث عادة المتطايرة الناجمة عن مصنع عاشب (HIPVs) من النباتات بعد هجوم 1،2 عاشب. وتنظم هذه HIPVs أساسا من حمض محطة دفاعية jasmonic هرمون (JA) والمتذبذب jasmonate الميثيل المشتقة (ميجا) 3،4،5. على مدى العقود الماضية الباحثين 3 وقد وثقت أن HIPVs يمكن صد أو جذب الحيوانات العاشبة ، وجذب الأعداء الطبيعية من الحيوانات العاشبة ، وفي بعض الحالات التي يمكن أن تحدث أو دفاعات النبات الوزراء قبل هجوم عاشب. في ورقة حديثة 6 ، ذكرت أن التغذية من يرقات عثة الغجر ، تطبيق ميخيا الخارجية ، والأضرار الميكانيكية حمل الانبعاثات من المواد المتطايرة من النباتات عنبية ، ولو بشكل مختلف. بالإضافة إلى ذلك ، عنبية فروع الاستجابة لHIPVs المنبعثة من الفروع المجاورة للمحطة نفسها من خلال زيادة مستويات JA ومقاومة العواشب (أي دفاعات النبات مباشرة) ، وانبعاثات فتيلة متقلبة (أي دفاعات النبات غير المباشرة). العثور مماثلةوقد أبلغ مؤخرا عن الميرمية بالجلسات 7 ، 8 الحور ، والفاصوليا 9..
هنا ، وأنا أصف طريقة دفع سحب لجمع المواد المتطايرة الناجمة عن عنبية عاشب (عثة الغجر) التغذية ، تطبيق ميخيا الخارجية ، والأضرار الميكانيكية. وحدة جمع متقلبة يتكون من غرفة ل 4 جمع متقلبة ، على مقصلة 2 قطعة ، ونظام لتنقية الهواء إيصال الهواء واردة ، ونظام فراغ متصلة فخ مليئة سوبر س الممتزات لجمع المواد المتطايرة 5،6،10 . وeluted المتطايرة التي تم جمعها في سوبر س الفخاخ مع ثنائي كلورو ميثان وانفصلوا ثم كميا باستخدام غاز الكروماتوغرافي (GC). وقد استخدم هذا الأسلوب لجمع متقلبة ن 6 دراستي للتحقيق في استجابة متقلبة من الفروع التالفة التعرض لالمتطايرة من فروع عاشب المتضررة داخل النباتات عنبية. يتم وصف هذه الأساليب هنا. باختصار ، يتعرض لفروع عنبية التالفة HIPVs جيئة وذهابام الفروع المجاورة في نفس النبات. باستخدام التقنيات نفسها التي وصفها أعلاه ، يتم جمع المواد المتطايرة المنبعثة من الفروع بعد التعرض لHIPVs وتحليلها.
ووصف دفع سحب جهاز جمع متقلبة هنا يمثل الطريقة القياسية للمجموعات فراغ الرأس من المواد المتطايرة النبات. وقد استخدم هذا الجهاز لتحديد استجابة متقلبة للأوراق التوت إلى الحيوانات العاشبة من يرقات عثة الغجر ، وسمح لي أيضا أن تقدم أدلة جديدة لدور HIPVs في داخل مصنع الإشارا?…
The authors have nothing to disclose.
المؤلف روبرت Holdcraft بفضل المساعدة التقنية. وقد تم تمويل هذه الدراسة جزئيا من منحة وزارة الزراعة الأميركية الخاصة CSREES (2009-34155-19957) والصناديق يفقس (NJ08192).
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
Volatile collection chambers | Analytical Research Systems, Inc. | VCC-G6X12DT-1P | Gainesville, FL |
Air compressor, 20 gal, oil free, 2 hp | Westward | 3JR71 | Sold by Grainger, Inc. |
Air delivery system | Analytical Research Systems, Inc. | VCS-ADS-4AFM4C | Gainesville, FL |
Air collection system | Analytical Research Systems, Inc. | VCS-MVCS-4CX1P | Gainesville, FL |
Vacuum pump 100-150V, ¼ hp | Gast Manufacturing, Inc. | 4F740 | Sold by Grainger, Inc. |
Methyl jasmonate | Sigma-Aldrich | J2500 | St. Louis, MO |
Tween-20 | Sigma-Aldrich | 93773 | St. Louis, MO |
Rhodamine-B | Sigma-Aldrich | St. Louis, MO | |
Plastic spray bottles, 2 oz | Setco Inc. | Cranbury, NJ | |
Spun polyester sleeves | Rockingham Opportunities Corp. | Reidsville, NC | |
Super-Q volatile collection traps | Analytical Research Systems, Inc. | VCT-1/4X3-SPQ | Gainesville, FL |
Scion Image Software | Scion Corporation | Frederick, MD | |
Dichloromethane | Sigma-Aldrich | 270997 | St. Louis, MO |
Gas chromatograph HP 6890 | Hewlett Packard | ||
Gas chromatograph Varian 3400 | Varian | ||
n-octane | Sigma-Aldrich | 296988 | St. Louis, MO |
Mass spectrometer MAT 8230 | Finnigan | San Jose, CA | |
HP-1 GC column | Agilent Technologies | Palo Alto, CA |
|
MDN-5S GC column | Supelco, Inc. | Bellefonte, PA |