Summary

Herbivore प्रेरित ब्लूबेरी वाष्पशील और इंट्रा - संयंत्र संकेतन

Published: December 18, 2011
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Summary

संयंत्र वाष्पशील इकट्ठा करने के लिए एक धक्का खींच विधि वर्णित है. विधि herbivore खिला, exogenous मिथाइल jasmonate, और यांत्रिक क्षति से प्रेरित वाष्पशील की तुलना के लिए अनुमति देता है. इस तकनीक को भी ब्लूबेरी पौधों के भीतर herbivore क्षतिग्रस्त शाखाओं से undamaged शाखाओं के अस्थिर वाष्पशील करने के लिए जोखिम के जवाब की जांच करने के लिए प्रयोग किया जाता है.

Abstract

Herbivore प्रेरित संयंत्र वाष्पशील (HIPVs) सामान्यतः herbivore हमले 1,2 के बाद संयंत्रों से उत्सर्जित कर रहे हैं. ये HIPVs मुख्य रूप से रक्षात्मक संयंत्र हार्मोन jasmonic एसिड (जावेद) और उसके अस्थिर व्युत्पन्न मिथाइल (MeJA) jasmonate 3,4,5 द्वारा विनियमित रहे हैं. पिछले 3 दशकों शोधकर्ताओं ओवर प्रलेखित है कि पीछे हटाना HIPVs या शाकाहारी आकर्षित कर सकते हैं, शाकाहारी के प्राकृतिक दुश्मन को आकर्षित करने के लिए, और वे कुछ मामलों में प्रेरित या प्रधानमंत्री संयंत्र गढ़ herbivore हमले से पहले कर सकते हैं. हाल ही में एक पत्र में 6, मैं जिप्सी कीट caterpillars, exogenous MeJA आवेदन, और यांत्रिक क्षति द्वारा की सूचना दी है कि खिला ब्लूबेरी पौधों से वाष्पशील प्रेरित उत्सर्जन अलग यद्यपि . इसके अलावा, ब्लूबेरी शाखाओं जावेद और शाकाहारी (यानी, सीधे संयंत्र गढ़) के प्रतिरोध के स्तर को बढ़ाने के द्वारा एक ही पौधे के पड़ोसी शाखाओं से उत्सर्जित HIPVs के लिए जवाब है, और भड़काना अस्थिर उत्सर्जन द्वारा (यानी, अप्रत्यक्ष संयंत्र गढ़). खोजने के इसी तरह केबैठकों 7 नागदौना, चिनार 8, और 9 लीमा सेम के लिए हाल ही में रिपोर्ट किया गया है ..

यहाँ, मैं धक्का – खींच ब्लूबेरी herbivore खिला (जिप्सी कीट), exogenous MeJA आवेदन, और यांत्रिक क्षति से प्रेरित वाष्पशील इकट्ठा करने के लिए एक विधि का वर्णन. अस्थिर संग्रह इकाई एक 4 एल अस्थिर संग्रह कक्ष, एक 2 टुकड़ा गिलोटिन, एक हवा वितरण प्रणाली है कि आने वाली हवा को शुद्ध, और एक वैक्यूम एक adsorbent सुपर – क्यू के साथ भरा जाल से जुड़े 5,6,10 वाष्पशील इकट्ठा प्रणाली के होते हैं . सुपर क्यू जाल में एकत्र वाष्पशील dichloromethane के साथ eluted कर रहे हैं और तब अलग और गैस क्रोमैटोग्राफी (जीसी) का उपयोग मात्रा. इस अस्थिर संग्रह विधि का इस्तेमाल किया था n 6 मेरे अध्ययन herbivore ब्लूबेरी पौधों के भीतर क्षतिग्रस्त शाखाओं से undamaged शाखाओं के अस्थिर वाष्पशील करने के लिए जोखिम के जवाब की जांच की. इन विधियों यहाँ वर्णित हैं. संक्षेप में, undamaged ब्लूबेरी शाखाओं HIPVs fro उजागर कर रहे हैंएक ही संयंत्र के भीतर मीटर पड़ोसी शाखाएं. ही ऊपर वर्णित तकनीकों का प्रयोग, HIPVs के लिए प्रदर्शन के बाद शाखाओं से उत्सर्जित वाष्पशील एकत्र कर रहे हैं और विश्लेषण.

Protocol

1. वाष्पशील के स्थानीय प्रेरण: herbivore क्षति ब्लूबेरी पौधों की दो शाखाओं एक काता पॉलिएस्टर आस्तीन के साथ जीती हैं. छह जिप्सी कीट caterpillars (2 एन डी -3 तीसरी instars) बैग के अंदर रखा जाता है और अस्थिर संग्र?…

Discussion

धक्का पुल अस्थिर संग्रह तंत्र यहाँ वर्णित संयंत्र वाष्पशील headspace संग्रह के लिए एक मानक पद्धति का प्रतिनिधित्व करता है. इस तंत्र के लिए ब्लूबेरी पत्तियों के अस्थिर जिप्सी कीट caterpillars द्वारा herbivory के जवाब का ?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

लेखक रॉबर्ट Holdcraft तकनीकी सहायता के लिए धन्यवाद. इस अध्ययन के हिस्से में एक USDA CSREES विशेष (2009-34155-19957) अनुदान और हैच धन (NJ08192) द्वारा वित्त पोषित किया गया था.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Volatile collection chambers Analytical Research Systems, Inc. VCC-G6X12DT-1P Gainesville, FL
Air compressor, 20 gal, oil free, 2 hp Westward 3JR71 Sold by Grainger, Inc.
Air delivery system Analytical Research Systems, Inc. VCS-ADS-4AFM4C Gainesville, FL
Air collection system Analytical Research Systems, Inc. VCS-MVCS-4CX1P Gainesville, FL
Vacuum pump 100-150V, ¼ hp Gast Manufacturing, Inc. 4F740 Sold by Grainger, Inc.
Methyl jasmonate Sigma-Aldrich J2500 St. Louis, MO
Tween-20 Sigma-Aldrich 93773 St. Louis, MO
Rhodamine-B Sigma-Aldrich   St. Louis, MO
Plastic spray bottles, 2 oz Setco Inc.   Cranbury, NJ
Spun polyester sleeves Rockingham Opportunities Corp.   Reidsville, NC
Super-Q volatile collection traps Analytical Research Systems, Inc. VCT-1/4X3-SPQ Gainesville, FL
Scion Image Software Scion Corporation   Frederick, MD
Dichloromethane Sigma-Aldrich 270997  St. Louis, MO
Gas chromatograph HP 6890 Hewlett Packard    
Gas chromatograph Varian 3400 Varian    
n-octane Sigma-Aldrich 296988 St. Louis, MO
Mass spectrometer MAT 8230 Finnigan   San Jose, CA
HP-1 GC column Agilent Technologies   Palo Alto,
CA
MDN-5S GC column Supelco, Inc.   Bellefonte, PA

Referências

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Citar este artigo
Rodriguez-Saona, C. R. Herbivore-induced Blueberry Volatiles and Intra-plant Signaling. J. Vis. Exp. (58), e3440, doi:10.3791/3440 (2011).

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