Un método push-pull para la recolección de plantas volátiles se describe. El método permite la comparación de los volátiles inducidos por la alimentación de los herbívoros, metil jasmonato exógenas, y los daños mecánicos. Esta técnica también se utiliza para investigar la respuesta de la volatilidad de las ramas en buen estado a la exposición a los volátiles de las ramas dañadas por herbívoros en las plantas de arándanos.
Inducida por herbívoros-volátiles de las plantas (HIPVs) son comúnmente emitidos por las plantas después de 1,2 herbívoro ataque. Estos HIPVs se rigen principalmente por el ácido jasmónico planta defensiva hormona (JA) y su jasmonato de metilo volátiles derivados (MeJA) 3,4,5. En los últimos tres años los investigadores han documentado que HIPVs pueden repeler o atraer a los herbívoros, atraer a los enemigos naturales de los herbívoros, y en algunos casos, pueden inducir o defensas primera planta antes del ataque de herbívoros. En un reciente artículo 6, me informaron que la alimentación de orugas de la polilla gitana, la aplicación exógena MeJA, y el daño mecánico induce la emisión de compuestos volátiles de las plantas de arándanos, aunque de manera diferente. Además, las sucursales de arándanos responder a HIPVs emitida por las ramas vecinas de la misma planta, incrementando los niveles de JA y la resistencia a los herbívoros (es decir, las defensas directas de las plantas), y por las emisiones de cebado volátiles (es decir, las defensas indirectas de las plantas). Resultados similaresIngs se ha informado recientemente de artemisa 7, 8 álamo, y habas 9 ..
Aquí, se describe un método push-pull para la recolección de arándanos volátiles inducidos por herbívoros (lagarta peluda) la alimentación, la aplicación exógena MeJA, y los daños mecánicos. La unidad de recogida volátiles consiste en una cámara de recogida de 4 L volátiles, una guillotina de 2 piezas, un sistema de suministro de aire que purifica el aire de entrada, y un sistema de vacío conectado a una trampa llena de Super-Q absorbente para recoger los volátiles 5,6,10 . Volátiles recogidas en el Super-Q trampas se eluyen con diclorometano y se separan y se cuantificó mediante cromatografía de gases (GC). Este método de recogida de volátiles se utilizó n-6 mi estudio para investigar la respuesta de la volatilidad de las ramas en buen estado a la exposición a los volátiles de las ramas dañadas por herbívoros en las plantas de arándanos. Estos métodos se describen a continuación. En pocas palabras, en buen estado las ramas de arándano están expuestos a HIPVs lado a otrom vecinos ramas dentro de la misma planta. Usando las mismas técnicas descritas anteriormente, los compuestos volátiles emitidos por las ramas después de la exposición a HIPVs se recogen y analizan.
El push-pull aparato colección volátiles descrito aquí representa un método estándar para las colecciones del espacio de cabeza de los volátiles de las plantas. Este aparato fue utilizado para determinar la respuesta volátiles de las hojas del arándano a la herbivoría por orugas de la polilla gitana y también me permitió ofrecer nuevas pruebas para el papel de HIPVs en la señalización dentro de la planta.
Los resultados presentados aquí indican que la alimentación de oruga, ex…
The authors have nothing to disclose.
El autor agradece a Robert Holdcraft de asistencia técnica. Este estudio fue financiado en parte por el USDA CSREES especiales Grant (2009-34155-19957) y los fondos de escotilla (NJ08192).
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
Volatile collection chambers | Analytical Research Systems, Inc. | VCC-G6X12DT-1P | Gainesville, FL |
Air compressor, 20 gal, oil free, 2 hp | Westward | 3JR71 | Sold by Grainger, Inc. |
Air delivery system | Analytical Research Systems, Inc. | VCS-ADS-4AFM4C | Gainesville, FL |
Air collection system | Analytical Research Systems, Inc. | VCS-MVCS-4CX1P | Gainesville, FL |
Vacuum pump 100-150V, ¼ hp | Gast Manufacturing, Inc. | 4F740 | Sold by Grainger, Inc. |
Methyl jasmonate | Sigma-Aldrich | J2500 | St. Louis, MO |
Tween-20 | Sigma-Aldrich | 93773 | St. Louis, MO |
Rhodamine-B | Sigma-Aldrich | St. Louis, MO | |
Plastic spray bottles, 2 oz | Setco Inc. | Cranbury, NJ | |
Spun polyester sleeves | Rockingham Opportunities Corp. | Reidsville, NC | |
Super-Q volatile collection traps | Analytical Research Systems, Inc. | VCT-1/4X3-SPQ | Gainesville, FL |
Scion Image Software | Scion Corporation | Frederick, MD | |
Dichloromethane | Sigma-Aldrich | 270997 | St. Louis, MO |
Gas chromatograph HP 6890 | Hewlett Packard | ||
Gas chromatograph Varian 3400 | Varian | ||
n-octane | Sigma-Aldrich | 296988 | St. Louis, MO |
Mass spectrometer MAT 8230 | Finnigan | San Jose, CA | |
HP-1 GC column | Agilent Technologies | Palo Alto, CA |
|
MDN-5S GC column | Supelco, Inc. | Bellefonte, PA |