Summary

Volatili Blueberry erbivori indotta e intra-impianto di segnalazione

Published: December 18, 2011
doi:

Summary

Un push-pull metodo per la raccolta di volatili impianto è descritto. Il metodo permette un confronto tra volatili indotte da alimentazione erbivoro, jasmonate metil esogena, e danni meccanici. Questa tecnica viene utilizzata anche per studiare la risposta volatili di rami danneggiati all'esposizione a sostanze volatili dai rami erbivoro-danneggiato all'interno di impianti di mirtillo.

Abstract

Erbivori indotta volatili impianto (HIPVs) sono comunemente emessi dalle piante dopo 1,2 erbivoro attacco. Queste HIPVs sono principalmente gestiti dalla difensiva acido jasmonic ormone vegetale (JA) e la sua jasmonate volatili metil derivato (Meja) 3,4,5. Nel corso degli ultimi 3 decenni, i ricercatori hanno documentato che HIPVs può attrarre o respingere gli erbivori, attraggono i nemici naturali degli erbivori, e in alcuni casi possono indurre o difese delle piante prima del primo attacco erbivoro. In un recente articolo 6, mi ha riferito che l'alimentazione da bruchi Lymantria, esogeni applicazione Meja, e danni meccanici indurre le emissioni di sostanze volatili dalle piante di mirtilli, anche se in modo diverso. Inoltre, le filiali mirtillo rispondere alle HIPVs emessi dai rami vicini della stessa pianta, aumentando i livelli di JA e resistenza erbivori (cioè, le difese impianto diretto) e dalle emissioni di adescamento volatili (ad esempio, le difese impianto indiretta). Trovare similiIngs sono stati segnalati recentemente per sagebrush 7, pioppo 8 e fagioli 9 ..

Ecco, ho descritto un push-pull metodo per la raccolta di volatili mirtillo indotte da erbivori (Lymantria dispar), l'alimentazione, l'applicazione esogena Meja, e danni meccanici. L'unità di rilevazione volatili è costituito da una camera di 4 Raccolta L volatili, a 2 pezzi ghigliottina, un sistema di erogazione dell'aria che purifica l'aria in entrata, e un sistema di vuoto collegato ad una trappola piena di Super-Q adsorbente per raccogliere volatili 5,6,10 . Volatili raccolti in Super-Q trappole vengono eluiti con diclorometano e poi separati e quantificati tramite gas cromatografia (GC). Questo metodo di raccolta dei volatili è stato utilizzato n 6 il mio studio per indagare la risposta volatili di rami danneggiati all'esposizione a sostanze volatili dai rami erbivoro-danneggiato all'interno di impianti di mirtillo. Questi metodi sono descritti qui. In breve, non danneggiata rami mirtillo sono esposti a HIPVs indietrom rami vicini all'interno della stessa pianta. Utilizzando le stesse tecniche sopra descritte, volatili emessi dalle filiali dopo l'esposizione a HIPVs sono raccolti e analizzati.

Protocol

1. Induzione locale di sostanze volatili: danni erbivoro Due rami di piante di mirtilli sono insaccato con un manicotto in poliestere filato. Sei bruchi Lymantria (2 ° -3 ° stadi) sono collocati all'interno dei palloni e ha permesso di nutrirsi di piante per 2 giorni prima della raccolta volatili. Piante di controllo non ricevono alcun bruchi. Emissioni volatili sono raccolti come descritto di seguito (protocollo # 7) il giorno 3 (Figura 1). Man…

Discussion

Il push-pull apparato collezione volatili qui descritto rappresenta un metodo standard per le collezioni dello spazio di testa dei volatili delle piante. Questo apparato è stato utilizzato per determinare la risposta volatili di foglie di mirtillo erbivori da bruchi Lymantria e mi ha permesso di fornire nuove prove per il ruolo di HIPVs in intra-impianto di segnalazione.

I risultati qui presentati mostrano che l'alimentazione bruco, esogeno applicato Meja, e ferendone meccanica aumento …

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

L'autore ringrazia Robert Holdcraft per assistenza tecnica. Questo studio è stato finanziato in parte da una CSREES USDA speciale Grant (2009-34155-19957) e fondi portello (NJ08192).

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Volatile collection chambers Analytical Research Systems, Inc. VCC-G6X12DT-1P Gainesville, FL
Air compressor, 20 gal, oil free, 2 hp Westward 3JR71 Sold by Grainger, Inc.
Air delivery system Analytical Research Systems, Inc. VCS-ADS-4AFM4C Gainesville, FL
Air collection system Analytical Research Systems, Inc. VCS-MVCS-4CX1P Gainesville, FL
Vacuum pump 100-150V, ¼ hp Gast Manufacturing, Inc. 4F740 Sold by Grainger, Inc.
Methyl jasmonate Sigma-Aldrich J2500 St. Louis, MO
Tween-20 Sigma-Aldrich 93773 St. Louis, MO
Rhodamine-B Sigma-Aldrich   St. Louis, MO
Plastic spray bottles, 2 oz Setco Inc.   Cranbury, NJ
Spun polyester sleeves Rockingham Opportunities Corp.   Reidsville, NC
Super-Q volatile collection traps Analytical Research Systems, Inc. VCT-1/4X3-SPQ Gainesville, FL
Scion Image Software Scion Corporation   Frederick, MD
Dichloromethane Sigma-Aldrich 270997  St. Louis, MO
Gas chromatograph HP 6890 Hewlett Packard    
Gas chromatograph Varian 3400 Varian    
n-octane Sigma-Aldrich 296988 St. Louis, MO
Mass spectrometer MAT 8230 Finnigan   San Jose, CA
HP-1 GC column Agilent Technologies   Palo Alto,
CA
MDN-5S GC column Supelco, Inc.   Bellefonte, PA

Referências

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Citar este artigo
Rodriguez-Saona, C. R. Herbivore-induced Blueberry Volatiles and Intra-plant Signaling. J. Vis. Exp. (58), e3440, doi:10.3791/3440 (2011).

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