Obtenção de amostras com retardado, acelerado e invertida Envelhecimento no Modelo Bee Mel

Resumo

Em trabalhadores da abelha do mel, o envelhecimento depende de comportamentos sociais, em vez de idade cronológica. Aqui nós mostramos como trabalhador-tipos com padrões muito diferentes de envelhecimento podem ser obtidas e analisadas para a senescência celular.

Resumo

Sociedades de animais altamente sociais apresentam grandes diferenças expectativa de vida entre os indivíduos intimamente relacionados. Entre os insetos sociais, a abelha é o melhor modelo estabelecido para estudar como plasticidade na expectativa de vida e envelhecimento é explicado por fatores sociais.

A casta dos trabalhadores das abelhas inclui abelhas enfermeira, que tendem a ninhada, e as abelhas forrageiras, que coletam néctar e pólen. Os trabalhos anteriores mostraram que as funções cerebrais e desempenho de vôo senesce mais rapidamente em forrageiras que em enfermeiros. No entanto, as funções do cérebro pode se recuperar, quando forrageiras voltar às tarefas de enfermagem. Tais padrões de senescência funcional acelerada e reverteu estão ligadas a níveis alterados de recursos metabólicos, a alterações na abundância de proteínas e função imunológica. Vitelogenina, uma proteína da gema com funções adaptadas no controle hormonal e de defesa celular, pode servir como um importante elemento regulador em uma rede que controla as diferentes dinâmicas de envelhecimento em trabalhadores.

Aqui nós descrevemos como o surgimento de enfermeiros e forrageiras podem ser monitorados, e manipulado, incluindo a reversão de forrageiras geralmente de curta duração para os enfermeiros de vida mais longa. Nossos resultados representativos mostram como indivíduos com idade cronológica semelhante diferenciar em forrageiras e abelhas de enfermagem em condições experimentais. Nós exemplificar como reversão do comportamento de forrageiras de volta para enfermeiros pode ser validado. Por último, que mostram como diferentes senescência celular pode ser avaliada pela medição da acumulação de lipofuscina, um biomarcador universal de senescência.

Para estudar os mecanismos que podem ligar as influências sociais e envelhecimento plasticidade, este protocolo fornece uma ferramenta padronizada definida para adquirir material de amostra relevante, e para melhorar a comparabilidade dos dados entre os estudos futuros.

Introdução

As estruturas complexas colônia de animais altamente sociais são mantidas através da interação de uma casta reprodutiva e uma casta de ajudante tipicamente trabalhadores não-reprodutores com diferentes comportamentos de tarefa social. Nos diferentes trabalhadores, adaptações fisiológicas específicas permitir comportamentos de cuidados sib distintos, e também estão ligados às diferenças tempo de vida extremas. As abelhas e os ratos-toupeira representam os modelos animais mais bem desenvolvidos para estudar como a sociabilidade está ligada a padrões de aceleração, insignificante ou revertida envelhecimento ^1-3.

Em colônias de abe....

Protocolo

1. A dissociação Senescence de idade cronológica

Esta seção descreve a instalação de colônias de coorte duplas, que consistem em um grupo de indivíduos identificados que compartilham a mesma idade cronológica ("faixa etária single") e um grupo de abelhas ninho. Indivíduos com Mesmas do único grupo etário acabará por separar-se em diferentes tipos de trabalho com diferentes dinâmicas de envelhecimento - estas são as abelhas enfermeira com abelhas diminuiu e forrageiras com declínio funcional acelerado. Todos os procedimentos são descritos de uma colónia experimental. Aconselhamos, no entanto, para realizar experimentos, pelo menos, dois colô....

Resultados

Seções 1 e 2 do Protocolo de detalhes como grupos de teste pode ser obtido para estudar atributos acelerado, desacelerou e inverteu o envelhecimento em colônias com uma única faixa etária. Para monitorar o tipo de trabalhador diferenciação que acompanha a ontogenia normal, avaliada a contagem de forrageiras ("contagens de entrada") por 6 colônias (Figura 1, comparar seção 1). Os gráficos mostram que a mudança considerável de enfermeira para o estado forager geralmente não é observado antes de .......

Discussão

Nós aqui adotar previamente descrita aproxima ^{8,16,17,19,20,} e integrá-los em um único fluxo de trabalho que irá facilitar a estudar o envelhecimento flexível em abelhas. Nosso objetivo é fornecer aos cientistas que são novatos neste campo com uma ferramenta padronizada definida para obter material de amostra relevante, e para melhorar a reprodutibilidade experimental entre as diferentes equipas de investigação. Enquanto os nossos procedimentos são simplificados e não requerem equipamento especial, como nas d.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Apifonda	Sü dzucker AG, Mannheim/Ochsenfurt, Alemanha
paraformaldeído	Sigma-Aldrich	158127
solução salina tamponada com fosfato	Sigma-Aldrich	P4417
Glicerol	Merck	1.04094.1000