Transformación es el proceso que ocurre cuando una célula ingiere ADN extraño de sus alrededores. Transformación puede ocurrir en la naturaleza en ciertos tipos de bacterias. En biología molecular, transformación es reproducir artificialmente en el laboratorio mediante la creación de poros en las membranas celulares bacterianas. Las células bacterianas que son capaces de tomar ADN del ambiente se denominan células competentes. En el laboratorio, las células bacterianas pueden hacerse competentes y ADN introducida posteriormente por un procedimiento llamado el método de choque de calor.
Transformación de choque de calor utiliza un ambiente rico de calcio proporcionado por cloruro de calcio para contrarrestar la repulsión electrostática entre el ADN plásmido y la membrana celular bacteriana. Un aumento repentino en la temperatura crea poros en la membrana plasmática de las bacterias y ADN plásmido permite entrar en la célula bacteriana. Este video va a través de un procedimiento paso a paso sobre cómo crear bacteria químicamente competente, realizar transformación de choque de calor, placa de la bacteria transformada y calcular la eficiencia de transformación.
Procedimento
Transformación bacteriana es un método ampliamente utilizado donde se introduce ADN extraño en una bacteria, que entonces puede amplificar o clonar el ADN. Las células que tienen la capacidad para fácilmente tomar este ADN se denominan células competentes. Aunque la transformación se produce naturalmente en muchos tipos de bacterias, los científicos han encontrado maneras de inducir artificialmente y mejorar la capacidad de una célula bacteriana. En este video vamos a hablar sobre una de estas mane…