Summary

ラットにおける心不全のための細胞ベースの治療:心筋梗塞および細胞およびバイオマトリックスの心外膜移植のためにダブル開胸

Published: September 22, 2014
doi:

Summary

げっ歯類モデルでLAD結紮により誘導される心筋梗塞を治療するためbiograftの移植は、従来、2つの心臓切開手術を必要としてきた。死亡率を減少させ、細胞に関連する、固体およびゼラチン状バイオマトリックスを固定するための最適な条件を提供するために、最小侵襲性処置が開発されてきた。

Abstract

心臓細胞療法は、細胞に関連生体材料の関心の高まりと注入が、心筋細胞送達を最適化するための大きな課題となって得ています。左前下動脈(LAD)結紮からなる心筋梗塞のげっ歯類モデル(MI)は、一般的に開胸を介して行われています。胸骨切開を介して第心臓切開手術は、伝統的に、治療の心外膜の用途のために行われている。 LAD結紮モデルの記述なので、手術後の死亡率は、しかし第二の手術が重要で推移している、百分の35から13まで低下した。術後の回復を改善し、痛みおよび感染を減少させるために、低侵襲性外科手術手順が提示される。二つの開胸術は、LAD結紮のための初期のものと治療心外膜投与のための第1を実施した。固体またはゲルタイプのマトリックスに関連した細胞からなるBiograftsは梗塞AR上に塗布し、EA。 2および6週後に行っ心エコー検査によって確認されるようにLAD結紮の心臓機能の喪失をもたらした。ゴールドナーは、心臓切片で実施トリクローム染色は、経壁瘢痕形成を確認した。第一及び第二の手術は少なく、その10%の術後死亡率をもたらした。

Introduction

19 世紀末以来、心血管疾患は、先進国でナンバーワンの連続殺人犯を推移している。これらの中でも、冠動脈疾患、メイン病因を表す。心筋梗塞(MI)および急性期の結果は次第に慢性期および重症心不全に向かって発達不適応リモデリングが続く。最近の重要な技術的および治療 ​​の進歩にもかかわらず、原因心不全の進行に罹患率と死亡率は依然として1を拡大しています。この文脈において、細胞療法は、心不全に向かって疾患の進行を停止させると、心筋の最近同定再生能を刺激するために新たな治療選択肢としてますます関心を集めている。実験的及び臨床的研究は、さまざまな細胞型の心臓移植後に得られる有益な効果の説得力のある証拠を提供した。主なアウトカムは改善されたカーディを含め交流収縮機能は、左心室リモデリングを減少させ、梗塞サイズを減少し、梗塞領域内の血管密度を増加させた。しかし、細胞注入後の低細胞数の保持は重要な欠点が残った。細胞送達2の改善するバイオマトリックスによる細胞の協会は最近、研究者や臨床関心を育んできた。

左冠動脈前下行枝(LAD)の連結は、経壁心筋梗塞および成熟瘢痕をもたらす小動物モデルにおける心筋梗塞のための参照方法です。 MIの慢性期に適用される細胞治療は、第二外科的介入を必要とします。胸骨正中切開は、通常、細胞またはbiograftsの心外膜注入の心筋内注入を可能にするために行われる。このような侵襲性外科手術手順は、死亡率、術後回復時間、痛み、感染症のリスクを高める。ここで紹介する低侵襲性のアプローチは、このようなバイアスを防ぐだけでなく、Oを提供するだけでなく治療適用のための心臓のptimalアクセス可能。 MIとゲル状のバイオマトリックスに関連する細胞の心外膜注入は左肋間開胸術を経由して拍動している心臓上で実行されます。

Protocol

注:ルイス雌雄ラット、200〜220グラムは、標準的な実験室条件(12時間の明暗周期、 自由摂取させ 、 水や食料、IVCケージ)の下で飼育した。すべての動物は、動物保護に関するFELASAとスイス法の勧告に準拠して処理した。 1。細胞の調製:骨髄から間葉系幹細胞の単離 5分間の誘導チャンバ内でイソフルラン5%とO 2を5L /分でラットを麻酔。…

Representative Results

すべての動物は、開胸した後1時間以内に回復した。創傷治癒は急速であった。いいえ感染や浮腫が認められなかった。 左ダブル開胸、心臓( 図1)への最適なアクセスを可能にした。痛みと手術後の死亡率は低かった。動物は、手術から素早く回収した( 図2)体重が増えた。カプランメイヤー生存率は、最初開胸96%であった。 104以上の4匹の?…

Discussion

LADの永久的な連結は、不可逆的な心筋障害を引き起こす。最初の動物モデルは、1960 4に記載した。以来、それは、慢性MIのための標準および適切なモデルとして考えられてきた。その安定性と再現性は、MI 5のための治療法の実験的評価を可能にした。最初の説明の後の改善の手順は、35から13までパーセント6の手術死亡率を報告した。

予想され?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者らは、研究の最初の部分のための財政支援のための教授ヘンドリックTevaearaiと心臓血管外科に感謝します。

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
POLYSORB 3-0 suture COVIDIEN UL 204
POLYSORB 5-0 suture COVIDIEN UL 202
SURGIPRO II 7-0 Suture COVIDIEN VP904X
CATHETER INSYTE 14G BD 381267
INSPIRA ADVANCED VOLUME CONTROLLED VENTILATOR HARVARD APPARATUS 557058
DUMONT #7 Forceps FST Germany 11274-20
Fibrin sealant BAXTER 1501441 TISSEEL Glue, Frozen -20°C
CASTROVIEJO EYE SPECULA HARVARD APPARATUS 72-8925 use as retractor for the ribs
IMDM Glutamax Gibco 31980
Pen/Strep Gibco 15140
FBS PAA Clone       A15-101
bone scissors Fine Science Tols 16044-10
Red Blood Cell Lysis Solution Gentra Systems D-50k1
Accutase cell detachment solution Stem cell technology 7920

Referências

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Citar este artigo
Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix. J. Vis. Exp. (91), e51390, doi:10.3791/51390 (2014).

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