Whole Vitré Dissection d'analyse Vitreodynamic
Summary
The goal of this protocol is to show an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes.
Abstract
The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous studies have shown the results of such dissections, the detailed steps have not been described, precluding researchers outside the field from replicating their methods. Other studies harvest vitreous either through aspiration, which does not maintain the vitreous structure anatomy, or through partial dissection, which only isolates the vitreous core. The proposed method isolates the whole vitreous body, with the vitreous core and cortex intact, while maintaining vitreous anatomy and structural integrity. In this method, a full thickness scleral flap in an enucleated porcine eye is first created and through this, the choroid tissue can be separated from the sclera. The scleral flap is then expanded and the choroid is completely separated from the sclera. Finally the choroid-retina tissue is peeled off the vitreous to leave an isolated intact vitreous body. The proposed vitreous dissection technique can be used to study physical properties of the vitreous humor. In particular, this method has significance for experimental studies involving drug delivery, vitreo-retinal oxygen transport, and intraocular convection.
Introduction
Le but de cette méthode est de définir une technique pour isoler un ensemble de corps vitré, intact, avec le noyau et le cortex intact vitreux, à partir d'un œil de cadavre, aux fins de l'analyse vitreodynamic. Comme le domaine de la physiologie vitreux a augmenté, de chercheurs multidisciplinaires, telles que la mécanique des fluides chercheurs, enquêtent sur les propriétés physiques et biomécaniques du corps vitré 1. À cette fin, il est essentiel de détail une technique pour isoler l'ensemble, corps vitré intacte pour aider les chercheurs multidisciplinaires.
Sebag et al. 2 et 3 autres dissections réalisées élégantes vitreux entiers sur des yeux de cadavres humains et ont montré des illustrations des résultats. Cependant, la technique utilisée n'a pas été décrite en détail et non-experts ne serait pas capable de se répliquer indépendamment de la méthode. D'autres études ont récolté vitré de yeux de cadavres à l'aide de méthodes plus simples telles que l'aspiration ou la dissection partielle,deux qui ne donnent pas, en tout un corps vitreux, intacte. Gisladottis et al. 4 et Xu et al. 5 enquêter perméabilité dans l'humeur vitrée récoltées à partir de cadavres yeux. Cependant, étant donné qu'aucune méthode d'extraction vitreux a été décrit, on a supposé qu'ils le corps vitré aspiré avec une seringue. Watts et al. 6 est allé plus loin en décrivant un procédé d'isolement de lapin humeur vitrée avec une technique chirurgicale. Cependant, cette méthode conduit à un isolement de seulement le noyau vitreux et non le cortex vitréen. Skeie et al. 7 organisé plus tard le corps vitré en 4 régions uniques et élégamment décrit une méthode pour disséquer chaque partie pour analyse. Cette technique toutefois, ne donne pas lieu à un vitreux intact dans son ensemble.
La technique actuelle a été développé pour faciliter les expériences biophysiques qui ne sont actuellement effectuées dans les yeux de cadavres. Les méthodes antérieures, comme décrit uneBove, sont limitées parce que 1) aucune isoler complètement l'ensemble du corps vitré, noyau vitreux 2) récoltés et le cortex sont homogénéisés, 3) structure anatomique vitré est pas maintenue, ou 4) techniques de dissection ne sont pas suffisamment détaillées pour la réplication par les chercheurs dans d'autres domaines . En outre, en raison de l'opacité de la sclérotique et la choroïde, la visualisation du corps vitré est limitée dans le globe oculaire intact. Ceci limite la précision et la faisabilité de mesures qui peuvent être faites à l'intérieur de l'œil entier. En outre, les structures anatomiques environnantes du vitré peuvent confondre l'étude des propriétés physiques et biochimiques du corps vitré.
Au cours des dernières années, le corps de la science vitreux a considérablement augmenté et il ya des raisons de croire que l'ensemble du corps vitré a des propriétés différentes de celles de ses parties individuelles. Il ya un intérêt croissant dans les enquêtes sur les propriétés physiques, biomécaniques et chimiques du corps vitré pour vitreodynamics research, ce qui a des applications en médecine clinique, tels que l'administration de médicaments, oxygénation intravitréenne 8 et vitrectomie. Vitreodynamics pharmacologiques, qui utilise des agents pharmacologiques pour manipuler le corps vitré, peuvent être utilisés pour améliorer les résultats de vitrectomie 9. Propriétés biomécaniques sont utilisés pour modéliser l'écoulement de fluide vitré, qui peut être utilisé pour améliorer les technologies d'administration de médicaments par voie intravitréenne 10-12. Les propriétés physiques des différents segments du corps vitré sont cruciales pour comprendre vitréo-rétinienne transport de l'oxygène 13. La technique proposée de dissection vitreux peut être utilisée pour étudier les différentes propriétés de l'humeur vitrée intacte. Il permet de paillasse expériences à faire sur les corps vitreux, entières intactes avec une meilleure visualisation.
En résumé, les méthodes actuelles pour l'étude du corps vitré soit ne sont pas décrits de manière adéquate, ou aboutissent à un isolement incomplète du noyau vitreux et le cortex. Par conséquent, il est nécessaire d'effectuer eXperiments dans un modèle oculaire transparent tout en conservant l'anatomie du corps vitré qui existe dans l'œil de cadavre.
Protocol
Representative Results
Discussion
Il ya deux étapes essentielles qui doivent être soigneusement exécutées lors de la dissection vitreux. Étape 3, la création d'un volet scléral pleine épaisseur, est cruciale pour l'ensemble de la dissection. Il faut prendre soin de ne pas couper dans la choroïde lors de la création de la pleine épaisseur volet scléral. L'autre étape essentielle est loin disséquait la sclérotique de la choroïde. Cette étape doit être effectuée avec soin pour éviter de créer de multiples trous dans la chor…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the following funding sources, Whittier Foundation, Harrington Foundation, National Institutes of Health and Research to Prevent Blindness.
Materials
| 0.3 forceps | Storz Opthalmics | E1793 | |
| Westcott Tenotomy Scissors Curved Right | Storz Opthalmics | E3320 R | |
| Scalpel Handle No. 3 | VWR | 25607-947 | |
| Scalpel Blade, #11, for #3 Handle | VWR | 470174-844 |
Referências
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