Summary

プラズマ凝固体内大動物モデルの肝臓組織の評価

Published: August 04, 2018
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Summary

実験的肝組織体内のプラズマ凝固法を評価するためにプロトコルをご紹介します。ブタのモデル レーザードップラー微小循環を検討、組織凝固深度を測定、凝固サイト赤外線放射温度計とサーモグラフィ カメラとダクトのシール効果で温度は圧力によって文書化されます。実験。

Abstract

プラズマ凝固焼灼の一形態としては、後の段階で出血を防ぐために主要な肝切除後大きい肝カット表面をシールする何十年も肝臓手術で使用されます。プラズマ凝固肝組織の厳密な効果は単に不十分検討しました。ブタのモデルでは、臨床応用に近い凝固効果を調べることができます。組み合わせたレーザー ドップラー流量計、分光光度計ドキュメント微小循環は非侵襲的、組織深さ 8 mm で凝固時変更臨床印象を超えて止血について定量的な情報を提供します。凝固過程で評価サーモグラフィ カメラと赤外線温度計前およびポスト凝固凝固サイトで温度、ガス ビーム温度の測定デバイスの上限のしきい値のために可能ではないです。凝固の深さは、ヘマトキシリン ・ エオシン オブジェクト マイクロメータの校正後染色標本の顕微鏡は測定し、電源設定凝固深度の関係について正確な情報を与えます。シール効果を胆管に調査する大きな血管をシールするプラズマ凝固装置のため不可能です。バースト圧力実験を血圧を除外する explanted 臓器に関連した効果。

Introduction

アルゴン プラズマ凝固法 (APC) は、三十年1,2以上の腹部手術で広く使われている楽器です。肝臓のシールによる主要な肝切除後の出血3を防ぐために表面をカット後、二次止血の達成のための標準的な技法です。プラズマ凝固法は、高周波電気焼灼器、イオン化されたガスのアークを介して電気エネルギーを提供の特殊な形式です。モノポーラ電熱止血を提供し、この非接触技術組織4に固執する電極を防止する利点があります。イオン化されたガスのビームは自動的に最低の電気抵抗の領域に送られます、抵抗上昇乾燥のため他の地域がまだ乾燥して離れになっています。これは凝固5,6の制服の限られた深さを生成します。凝固効果に影響する要因は活性化凝固装置とプローブから組織までの距離の電源設定の時間します。ヘリウムは別のキャリア ガスをプラズマ凝固7に使用することができます。最近の臨床研究に集中して成績ではなく、機能的な組織学的所見3,8,9,生体外で調査10 に焦点を当てた実験中または分離臓器11実験。

基になるプロトコルにより、豚の人間の標準的な装置を使用して臨床応用に近い大規模な動物モデルのプラズマ凝固法の効果に関する研究: 微小循環がレーザーのドップラー流量計による非侵襲的評価と分光光度計、この表示12,13の標準的な臨床ツールです。凝固過程での温度変化は、赤外線放射温度計とサーモグラフィ カメラで監視されます。凝固の深さは、組織学的ヘマトキシリン ・ エオシン組織サンプルの採取後のセクションを染色で測定されます。二次止血のための他の手段との比較、バースト圧力実験を行った。血圧を除外する explanted 器官で実施されますが前述のテクニック14とは対照的に関連した効果。プラズマ凝固のローカル影響の調査の説明に加えてブタモデルで標準的な血液検査を実施することもできます。

Protocol

原則研究所動物ケアの (健康の国民の協会文書編 8、2011) と同様、動物研究のドイツの立法によって支配される規則に従っていた。政府の動物の世話のオフィス (Landesamt für Natur 環 und Verbraucherschutz ノルトライン ・ ヴェストファーレン州、レックリングハウゼン、ドイツ) から公式許可します。 1. 動物 オープンケージで収容 (25-30 kg) 女性ドイツ在来種豚を使用しま…

Representative Results

微小循環:次のプラズマ凝固止血診断装置を利用したは、微小循環の変化によって発揮できます。142.7 ± 76.08 のベースライン値から毛細血管血流 (任意の単位 (AU) として表示) が減少 57.78 ± 49.57 AU 25 W デバイス、出力 48.5 ± 7.26 で AU AU 5.04 ± 1.31 と 50 W で 100 W (図 4) で AU。 温度:…

Discussion

長い時間16肝臓手術の齧歯動物モデルが確立されます。大動物モデルがある特定の利点を提供するにもかかわらず、: 人間のための標準的な手術機器を適用できる、手術手技、臨床使用に匹敵する、標準的な臨床的評価方法は、顕微鏡の装置は必要ありません実験に移ります。特別な実験室試験方法 (図 10) を必要とせず標準臨床血液検査が実施される?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者の謝辞があります。

Materials

Xylazine 20 mg/mL Vetoquinol GmbH Xylapan
Ketamine 100 mg/mL Ceva GmbH Ceva Ketamine Injection
Atropine 100 mg / 10 mL Dr. Franz Köhler Chemie GmbH Atropinsulfat Köhler 100mg Amp.
Propofol Fresenius Kabi GmbH Propofol 1% MCT Fresenius
Fentanyl KG Rotexmedica GmbH Fentanyl 0,5mg Rotexmedica
Isoflurane Abbot GmbH Forene 100% (V/V) 250 mL
Ringer's lactate solution Baxter Deutschland GmbH sodium 131mmol/l, potassium 5 mmol/l, calcium 2 mmol/l, cloride 111 mmol/l, lactate 29 mmol/l
Surgical disinfactant Schülke & Mayr GmbH Kodan Tinktur forte gefärbt 1l 104804
Motorized microscope Nikon Instruments Europe Eclipse TE2000-E
Microscope camera Nikon Instruments Europe Digitalsight DS-Qi1Mc
Imaging software Nikon Instruments Europe NIS elements Vers. 4.40
Plasma coagulator Söring GmbH CPC-1000
Argon gas Linde AG Argon 4.8 
Helium gas Linde AG Helium 4.8
O2C LEA Medizintechnik GmbH O2C Version 1212 with LF-2 or LF-3 probe
Infrared thermometer Voltcraft VOLTCRAFT IR 260-8S
Thermographic camera InfraTec GmbH VarioCAM HD head 820
Thermographic analysis sofrtware InfraTec GmbH IRBIS 3
Mayer's Hematoxylin solution Merck 1.09249
Eosin solution VWR International GmbH Merck 1.09844
Rollerpump Masterflex L/S easy Load Cole-Parmer Instrument Company model 7518-10
Perfusorpump B. Braun Melsungen AG Perfusor secura FT
Digital pressure meter Greisinger electronic GMH 3161
Perfusorsyringe, 50 mL B. Braun Melsungen AG REF 8728810 F
Perfusor line, Type IV Standard, PVC Luer lock B. Braun Melsungen AG REF 8722960
3-Way stopcock, Dicofix C35C B. Braun Melsungen AG REF 16494 C
Silk 2-0. 3 metric Resorba REF H5F
Vicryl 4-0 Sutupak Ethicon V1224H
NaCl 0.9 % B. Braun Melsungen AG

Referências

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Glowka, T. R., Paschenda, P., Czaplik, M., Kalff, J. C., Tolba, R. H. Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo. J. Vis. Exp. (138), e57355, doi:10.3791/57355 (2018).

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