Summary

Plazma koagülasyon büyük hayvan modeli Vivo içinde karaciğer dokusu üzerinde değerlendirilmesi

Published: August 04, 2018
doi:

Summary

Burada deneysel olarak karaciğer dokusu içinde vivoplazma koagülasyon değerlendirmek için bir protokol mevcut. Bir domuz modelinde mikro lazer Doppler tarafından incelenir, koagülasyon derinlik histolojik olarak ölçülür, koagülasyon sitesini kızılötesi termometre ve termografik kamera ve kanal etkisi sızdırmazlık sıcaklıkta patlama basıncı ile belgelenen deneyler.

Abstract

Plazma koagülasyon elektrokoter biçimi olarak yıllardır karaciğer ameliyatta kanama daha sonraki bir aşamada önlemek için büyük hepatectomy sonra geniş karaciğer kesme yüzeyi mühürlemek için kullanılır. Plazma koagülasyon karaciğer dokusu üzerinde tam etkileri sadece kötü incelenir. Bizim domuz modelinde, koagülasyon etkileri yakın klinik uygulama incelenebilir. Bir kombine lazer Doppler akış ölçer ve spektrofotometre belgeleri mikro koagülasyon 8 mm doku derinlikte sırasında noninvazif,-mek şartıyla hemostaz öznel klinik izlenim ötesinde ölçülebilir vukuf değiştirir. Koagülasyon sitesi sıcaklığında bir kızılötesi termometre rahip ve post Koagülasyon ve termografik kamera ile koagülasyon sırasında değerlendirilir, gaz ışın sıcaklık ölçüm aygıtları üst eşik nedeniyle mümkün değildir. Koagülasyon derinliği mikroskobik hematoksilen eozin/bölümler kalibrasyon sonra lekeli bir nesne mikrometre ile ölçülür ve güç ayarı-koagülasyon derinlik ilişkisi hakkında tam bir bilgi verir. Bir plazma coagulator büyük kan damarları imzalamaya mümkün değil gibi sızdırmazlık etkisi safra kanalları üzerinde incelenir. Patlama basınç deneylerde yürütülen dışarı explanted organlarda kan basıncı dışarı kural etkileri ile ilgili.

Introduction

Argon plazma koagülasyon (APC) için üç yıl1,2‘ den daha fazla karın cerrahisinde bir yaygın olarak kullanılan alettir. Karaciğer mühürleyerek büyük hepatectomy daha sonra kanama3önlemek için yüzey kestikten sonra sekonder hemostaz başarı için standart bir tekniktir. Plazma koagülasyon iyonize gaz bir yay ile elektrik enerjisi teslim Radyofrekans elektrokoter özel bir şeklidir. Monopolar Elektrotermik hemostaz sağlayarak, bu aygıtlar teknik için doku4sopa elektrot önleme avantajına sahiptir. İyonize gaz ışın en düşük elektriksel direnç alanına otomatik olarak yönlendirilir ve direnç henüz kurumuş diğer bölgelerine kuruma nedeniyle doğduğunda uzakta etkinleşir. Bu bir üniforma sınırlı derinlik koagülasyon5,6üretir. Koagülasyon etkisi etkileyen faktörlerdir belgili tanımlık harekete geçirmek zaman, koagülasyon aygıt ve doku sonda mesafe güç ayarı. Helyum plazma koagülasyon7için kullanılabilir başka bir taşıyıcı gaz var. Histolojik ve fonksiyonel bulgular3,8,9, deneysel çalışmalar üzerine vitro araştırmalar10 odaklanmış iken yerine üzerine konsantre klinik sonuçlar son klinik çalışmalar veya izole organ periosteum11üzerinde deneyler.

Büyük bir hayvan modelinde standart insan domuzlar üzerinde kullanýlýyor klinik uygulama yakın plazma koagülasyon etkileri çalışmanın temel Protokolü sağlar: mikro lazer Doppler Flowmetre tarafından değerlendirildi noninvazif ve spektrofotometre, bu gösterge12,13standart bir klinik araçtır. Sıcaklık değişiklikleri koagülasyon sırasında bir kızılötesi termometre ve termografik kamera ile izlenir. Koagülasyon derinliği histolojik hematoksilen/eozin doku örnekleri hasat sonrası bölümleri lekeli ölçülür. Sekonder hemostaz için diğer araçlar ile karşılaştırma için patlama basınç deneyler yapılmaktadır. Yukarıda açıklanan teknikleri14aksine, Bunlar kan basıncı dışlamak için explanted organları yapılır ile ilgili etkileri. Yerel etkileri plazma koagülasyon açıklanan soruşturma ek olarak, standart kan testleri de domuz modelinde üstlenilen.

Protocol

Hayvan çalışmaları yanı sıra ilkeleri laboratuvar hayvan bakım (Ulusal Sağlık Enstitüleri yayını derleyen 8, 2011) Alman mevzuatı tarafından yönetilen kuralları takip edildi. Toplum hayvan bakımı ofisinden (Landesamt für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz Nordrhein-Westfalen, Recklinghausen, Almanya) resmi izni verilir. 1. hayvanlar (25-30 kg ağırlıklı) dişi Alman landrace domuz açık kafeslerde yer alan kullanın. Grup (argon ve helyum) başına 5…

Representative Results

Mikro: Hemostazın plazma koagülasyon takip için tanı cihazı kullanan mikro değişikliklerden göstermiş olabilir. Kılcal kan akışı (rasgele birimleri (AU) görüntülenir) azalır 142.7 ± 76,08 bir temel değerinden AU 57.78 ± 49.57 48,5 ± 7.26 25 W aygıt çıkış gücü AU AU 50 W ve 5,04 ± 1,31 AU 100 W (Şekil 4). Sıcaklığı: Koagülasyon site…

Discussion

Kemirgen modelleri karaciğer ameliyatı için uzun süre16için kurulur. Yine de, büyük hayvan modeller belirli avantajlar sunuyor: mikrocerrahi hiçbir ekipman gibi insanlar için standart operatif ekipman uygulanabilir, cerrahi teknik klinik kullanım için karşılaştırılabilir ve standart klinik değerlendirme yöntemleri-ebilmek var olmak gerekli deneyler için transfer. Örneğin, standart klinik kan testleri için özel laboratuvar test yöntemleri (Şekil 10</str…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.

Materials

Xylazine 20 mg/mL Vetoquinol GmbH Xylapan
Ketamine 100 mg/mL Ceva GmbH Ceva Ketamine Injection
Atropine 100 mg / 10 mL Dr. Franz Köhler Chemie GmbH Atropinsulfat Köhler 100mg Amp.
Propofol Fresenius Kabi GmbH Propofol 1% MCT Fresenius
Fentanyl KG Rotexmedica GmbH Fentanyl 0,5mg Rotexmedica
Isoflurane Abbot GmbH Forene 100% (V/V) 250 mL
Ringer's lactate solution Baxter Deutschland GmbH sodium 131mmol/l, potassium 5 mmol/l, calcium 2 mmol/l, cloride 111 mmol/l, lactate 29 mmol/l
Surgical disinfactant Schülke & Mayr GmbH Kodan Tinktur forte gefärbt 1l 104804
Motorized microscope Nikon Instruments Europe Eclipse TE2000-E
Microscope camera Nikon Instruments Europe Digitalsight DS-Qi1Mc
Imaging software Nikon Instruments Europe NIS elements Vers. 4.40
Plasma coagulator Söring GmbH CPC-1000
Argon gas Linde AG Argon 4.8 
Helium gas Linde AG Helium 4.8
O2C LEA Medizintechnik GmbH O2C Version 1212 with LF-2 or LF-3 probe
Infrared thermometer Voltcraft VOLTCRAFT IR 260-8S
Thermographic camera InfraTec GmbH VarioCAM HD head 820
Thermographic analysis sofrtware InfraTec GmbH IRBIS 3
Mayer's Hematoxylin solution Merck 1.09249
Eosin solution VWR International GmbH Merck 1.09844
Rollerpump Masterflex L/S easy Load Cole-Parmer Instrument Company model 7518-10
Perfusorpump B. Braun Melsungen AG Perfusor secura FT
Digital pressure meter Greisinger electronic GMH 3161
Perfusorsyringe, 50 mL B. Braun Melsungen AG REF 8728810 F
Perfusor line, Type IV Standard, PVC Luer lock B. Braun Melsungen AG REF 8722960
3-Way stopcock, Dicofix C35C B. Braun Melsungen AG REF 16494 C
Silk 2-0. 3 metric Resorba REF H5F
Vicryl 4-0 Sutupak Ethicon V1224H
NaCl 0.9 % B. Braun Melsungen AG

Referências

  1. Link, W. J., Incropera, F. P., Glover, J. L. A plasma scalpel: comparison of tissue damage and wound healing with electrosurgical and steel scalpels. ArchSurg. 111, 392-397 (1976).
  2. Kwon, A. H., Inui, H., Kamiyama, Y. Successful laparoscopic haemostasis using an argon beam coagulator for blunt traumatic splenic injury. EurJSurg. 167, 316-318 (2001).
  3. Frilling, A., et al. Effectiveness of a new carrier-bound fibrin sealant versus argon beamer as haemostatic agent during liver resection: a randomised prospective trial. Langenbecks ArchSurg. 390, 114-120 (2005).
  4. Raiser, J., Zenker, M. Argon plasma coagulation for open surgical and endoscopic applications: state of the art. J Phys Appl Phys. 39 (16), 3520-3523 (2006).
  5. Farin, G., Grund, K. E. Technology of argon plasma coagulation with particular regard to endoscopic applications. EndoscSurgAllied Technol. 2, 71-77 (1994).
  6. Grund, K. E. Argon plasma coagulation (APC): ballyhoo or breakthrough?. Endoscopy. 29, 196-198 (1997).
  7. Glowka, T. R., Standop, J., Paschenda, P., Czaplik, M., Kalff, J. C., Tolba, R. H. Argon and helium plasma coagulation of porcine liver tissue. J Int Med Res. , (2017).
  8. Dowling, R. D., Ochoa, J., Yousem, S. A., Peitzman, A., Udekwu, A. O. Argon beam coagulation is superior to conventional techniques in repair of experimental splenic injury. JTrauma. 31, 717-720 (1991).
  9. Go, P. M., Goodman, G. R., Bruhn, E. W., Hunter, J. G. The argon beam coagulator provides rapid hemostasis of experimental hepatic and splenic hemorrhage in anticoagulated dogs. JTrauma. 31, 1294-1300 (1991).
  10. Brand, C. U., Blum, A., Schlegel, A., Farin, G., Garbe, C. Application of argon plasma coagulation in skin surgery. Dermatology. 197, 152-157 (1998).
  11. Carus, T., Rackebrandt, K. Collateral tissue damage by several types of coagulation (monopolar, bipolar, cold plasma and ultrasonic) in a minimally invasive, perfused liver model. ISRNSurg. , 518924 (2011).
  12. Bludau, M., Vallbohmer, D., Gutschow, C., Holscher, A. H., Schroder, W. Quantitative measurement of gastric mucosal microcirculation using a combined laser Doppler flowmeter and spectrophotometer. DisEsophagus. , (2008).
  13. Beckert, S., Witte, M. B., Konigsrainer, A., Coerper, S. The impact of the Micro-Lightguide O2C for the quantification of tissue ischemia in diabetic foot ulcers. Diabetes Care. 27, 2863-2867 (2004).
  14. Erdogan, D., de Graaf, W., van Gulik, T. M. Adhesive strength of fibrinogen-coated collagen patch or liquid fibrin sealant in an experimental liver resection model in pigs. Eur Surg Res Eur Chir Forsch Rech Chir Eur. 41 (3), 298-302 (2008).
  15. Knobloch, K., et al. Microcirculation of the sternum following harvesting of the left internal mammary artery. ThoracCardiovascSurg. 51, 255-259 (2003).
  16. Kanzler, S., et al. Recommendation for severity assessment following liver resection and liver transplantation in rats: Part I. Lab Anim. 50 (6), 459-467 (2016).
  17. Pehböck, D., Dietrich, H., Klima, G., Paal, P., Lindner, K. H., Wenzel, V. Anesthesia in swine optimizing a laboratory model to optimize translational research. Anaesthesist. 64 (1), 65-70 (2015).
  18. Nykonenko, A., Vávra, P., Zonča, P. Anatomic Peculiarities of Pig and Human Liver. Exp Clin Transplant Off J Middle East Soc Organ Transplant. 15 (1), 21-26 (2017).
  19. Fechner, G., von Pezold, J., Luzar, O., Hauser, S., Tolba, R. H., Müller, S. C. Modified spectrometry (O2C device) of intraoperative microperfusion predicts organ function after kidney transplantation: a pilot study. Transplant Proc. 41 (9), 3575-3579 (2009).
  20. Patterson, E. J., Scudamore, C. H., Owen, D. A., Nagy, A. G., Buczkowski, A. K. Radiofrequency ablation of porcine liver in vivo: effects of blood flow and treatment time on lesion size. AnnSurg. 227, 559-565 (1998).

Play Video

Citar este artigo
Glowka, T. R., Paschenda, P., Czaplik, M., Kalff, J. C., Tolba, R. H. Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo. J. Vis. Exp. (138), e57355, doi:10.3791/57355 (2018).

View Video