Manken Circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen glokom
Summary
Kronik oküler hipertansiyon circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler, Retina ganglion hücrelerinin glokom ile tutarlı fonksiyonel ve yapısal bozulma yol uygulayarak indüklenen.
Abstract
Circumlimbal dikiş Rodents deneysel glokom kronik göz içi basıncı (gib), glokom için iyi bilinen bir risk faktörü yükselen tarafından inducing bir tekniktir. Bu iletişim kuralı bir adım adım kılavuz bu teknikte uzun Evans sıçanlar ve C57BL/6 fareler üzerinde gösterir. Genel anestezi altında “çanta-dize” dikiş konjonktiva, Ekvator çevresinde ve limbus gözün arkasında uygulanır. Adam göz tedavi edilmemiş bir denetimi olarak hizmet vermektedir. 8 hafta boyunca fareler ve fareler için 12 haftalık bir süre oldu, bizim çalışma süresi boyunca düzenli olarak rebound tonometry topikal anestezi olmadan bilinçli hayvanlarda tarafından ölçülen IOP yükseltilmiş, kaldı. Her iki tür dikilmiş gözleri electroretinogram özellikleri Tercihli iç Retina fonksiyon bozukluğu ile tutarlı gösterdi. Optik koherens tomografi seçici retina sinir lifi tabakası inceltme gösterdi. Kesit buldum sıçan retinada Histoloji ganglion hücre katmanı hücre yoğunluğu, ama herhangi bir değişiklik diğer hücresel katmanları azaltılmış. Fare düz monte retinae bir ganglion hücre belirli marker ile (RBPMS) boyama ganglion hücre kaybı doğruladı. Basit, minimal invaziv ve maliyet-etkin şekilde sıçanlar ve fareler ganglion hücre yaralanmalara yol açar oküler hipertansiyon neden circumlimbal dikiş var.
Introduction
Hayvan modelleri cep laboratuvar incelenmesi için önemli bir platform potansiyel terapötik müdahaleler değerlendirmek için de temel glokom Patogenez işler sağlar. Birkaç indüklenebilir modelleri sürekli göz içi basıncı (gib) yükseklik, glokom için en önemli risk faktörü üretmek için geliştirilmiştir. GİB yükseltmek için uygulanan yöntemler içerir: episcleral hipertonik serum fizyolojik yerleştirmeye damarlar1, laser photocoagulation trabeküler meshwork2 veya3limbal damarlar ve intracameral enjeksiyon gibi maddelerin hayalet kırmızı kan hücreleri4, lastikteki5,6 ve viskoelastik ajanlar7. Her yaklaşımın avantajları ve sınırlamalar vardır.
Glokom için iyi bir model travma, inflamasyon ve medya opaklıklar gibi minimal komplikasyon ile hastalık süreci taklit. Bu komplikasyonlar IOP ayrıcalık ikna etmek için kullanılan yordamlar ile sık sık ilişkili olan ve sonuçların yorumlanması yıkmak. Örneğin, hatta yabancı maddelerin tanıtıldı değil zaman parasentez ön odasının travma ve tipik glaucomatous değişiklik8,9/ göstermemektedir iltihap neden olduğu gösterilmiştir. İltihap kaçınarak önemini yanı sıra vivo içinde görüntüleme ve hastalık ilerleme izlemek için Elektrofizyoloji optik netlik bakımı kolaylaştırır. Ne ölçüde belirsiz olmasına rağmen bu komplikasyonlar hastalığı araştırmalar, etkileyebilir modeli indüksiyon sırasında göz penetran önlemek için daha iyi olabilir. Circumlimbal dikiş yaklaşım dünya nüfuz önler ve Retina yapısı ve fonksiyonu içinde vivo boyuna değerlendirilmesi kolaylaştırır. Daha da önemlisi, öncekilerin kapasitesini IOP temel değerleri için gerektiğinde dikiş kaldırma tarafından elde etmek için bu modeli farklıdır. GİB normalleştirme hücresel eğitim için yararlı olabilir ve geri dönüşümlü ve geri dönüşümsüz ganglion moleküler ilişkilendirir yaralanma10,11,12,13,14hücre.
Bu makale modeli indüksiyon için teknik üzerinde duruluyor. Bu modelde sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen Retina yaralanma karakterizasyonu15,16,17,18,19daha ayrıntılı olarak başka bir yerde bulunabilir.
Protocol
Representative Results
Discussion
Circumlimbal dikiş kronik oküler hipertansiyon yeni bir modeldir. Hangi kaynaklı16,18temsilcisi sonuçlarıdır çalışmalar yanı sıra, bir dizi son çalışmalar15,23,24,25 Bu hayvan modeli kullanıldığında vardır ,26. Bu önceki raporlar arasında karşılaştırma gösterir yöntemi yinel…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu eser Ulusal Sağlık ve tıbbi araştırma Konseyi Avustralya proje desteği (1046203), Avustralya Araştırma Konseyi gelecek Bursu (FT130100338) tarafından finanse edilmektedir.
Materials
| normal saline | Baxter International Inc | AHB1323 | Maintain corneal hydration during surgery |
| Chlorhexadine 0.5% | Orion Laboratories | 27411, 80085 | Disinfection of surgical instrument |
| Isoflurane 99.9% | Abbott Australasia Pty Ltd | CAS 26675-46-7 | Proprietory Name: Isoflo(TM) Inhalation anaaesthetic. Pharmaceutical-grade inhalation anesthetic mixed with oxygen gas for suture procedure |
| ocular lubricant | Alcon Laboratories | 1618611 | Proprietory Name: Genteal, ocular lubricant to keep the other eye moist |
| Needle holder (microsurgery) | World Precision Instruments | 555419NT | To hold needle during ocular surgery |
| Proxymetacaine 0.5% | Alcon Laboratories | CAS 5875-06-9 | Topical ocular analgesia |
| Scissors (microsurgery) | World Precision Instruments | 501232 | To cut excessive suture stump during ligation |
| Surgical drape | Vital Medical Supplies | GM29-612EE | Ensure sterile enviornment during surgery |
| Suture needle for rats (microsurgery) | Ninbo medical needles | 151109 | 8-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm |
| Suture needle for mice (microsurgery) | Ninbo medical needles | 160905 | 10-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm |
| Tweezers (microsurgery) | World Precision Instruments | 500342 | Manipulate tissues during ocular surgery |
| rebound tonometer | TONOLAB, iCare, Helsinki, Finland | TV02 | for intraocular pressure monitoring |
Referências
- Morrison, J. C., et al. A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage. Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).
- Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects. Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).
- Chiu, K., Chang, R., So, K. F. Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats. Journal of Visualized Experiments. (10), 549 (2007).
- Quigley, H. A., Addicks, E. M. Chronic experimental glaucoma in primates. I. Production of elevated intraocular pressure by anterior chamber injection of autologous ghost red blood cells. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 19 (2), 126-136 (1980).
- Bunker, S., et al. Experimental glaucoma induced by ocular injection of magnetic microspheres. Journal of Visualized Experiments. (96), (2015).
- Weber, A. J., Zelenak, D. Experimental glaucoma in the primate induced by latex microspheres. Journal of Neuroscience Methods. 111 (1), 39-48 (2001).
- Moreno, M. C., et al. A new experimental model of glaucoma in rats through intracameral injections of hyaluronic acid. Experimental Eye Research. 81 (1), 71-80 (2005).
- Hoyng, P. F., Verbey, N., Thorig, L., van Haeringen, N. J. Topical prostaglandins inhibit trauma-induced inflammation in the rabbit eye. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 27 (8), 1217-1225 (1986).
- Kezic, J. M., Chrysostomou, V., Trounce, I. A., McMenamin, P. G., Crowston, J. G. Effect of anterior chamber cannulation and acute IOP elevation on retinal macrophages in the adult mouse. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 54 (4), 3028-3036 (2013).
- Waisbourd, M., et al. Reversible structural and functional changes after intraocular pressure reduction in patients with glaucoma. Graefe’s Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (6), 1159-1166 (2016).
- Foulsham, W. S., Fu, L., Tatham, A. J. Visual improvement following glaucoma surgery: a case report. BMC Ophthalmology. 14, 162 (2014).
- Anderson, A. J., Stainer, M. J. A control experiment for studies that show improved visual sensitivity with intraocular pressure lowering in glaucoma. Ophthalmology. 121 (10), 2028-2032 (2014).
- Ventura, L. M., Feuer, W. J., Porciatti, V. Progressive loss of retinal ganglion cell function is hindered with IOP-lowering treatment in early glaucoma. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 53 (2), 659-663 (2012).
- Zhao, D., et al. ARVO abstract number 3696 – B0043. annual meeting of Association for Research in Vision and Ophthalmology, Honolulu, Hawaii, USA. , (2018).
- Liu, H. H., et al. Chronic ocular hypertension induced by circumlimbal suture in rats. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 56 (5), 2811-2820 (2015).
- Zhao, D., et al. Characterization of the Circumlimbal Suture Model of Chronic IOP Elevation in Mice and Assessment of Changes in Gene Expression of Stretch Sensitive Channels. Frontiers in Neuroscience. 11, 41 (2017).
- Nguyen, C. T., et al. Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats. Journal of Visualized Experiments. (113), (2016).
- Van Koeverden, A. K., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. Systemic hypertension is not protective against chronic IOP elevation in a rodent model. Scientific Reports. 8 (1), 7107 (2018).
- Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina. Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).
- Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. Twenty-four-hour pattern of mouse intraocular pressure. Exp Eye Research. 77 (6), 681-686 (2003).
- Jia, L., Cepurna, W. O., Johnson, E. C., Morrison, J. C. Patterns of intraocular pressure elevation after aqueous humor outflow obstruction in rats. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41 (6), 1380-1385 (2000).
- Nadal-Nicolas, F. M., Jimenez-Lopez, M., Sobrado-Calvo, P., Nieto-Lopez, L., Canovas-Martinez, I., Salinas-Navarro, M., Vidal-Sanz, M., Agudo, M. Brn3a as a marker of retinal ganglion cells: qualitative and quantitative time course studies in naive and optic nerve-injured retinas. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 50 (8), 3860-3868 (2009).
- Liu, H. H., Flanagan, J. G. A Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension Induced by Circumlimbal Suture. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 58 (1), 353-361 (2017).
- Liu, H. H., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. Reversal of functional loss in a rat model of chronic intraocular pressure elevation. Ophthalmic & Physiological Optics. 37 (1), 71-81 (2017).
- Liu, H. H., Zhang, L., Shi, M., Chen, L., Flanagan, J. G. Comparison of laser and circumlimbal suture induced elevation of intraocular pressure in albino CD-1 mice. PLoS One. 12 (11), 0189094 (2017).
- Shen, H. H., et al. Intraocular Pressure Induced Retinal Changes Identified Using Synchrotron Infrared Microscopy. PLoS One. 11 (10), 0164035 (2016).
