Modelo de apendicectomia Murina de colite crônica câncer colorretal associado por localização precisa do remendo de Caecal

Summary

O protocolo apresentado descreve uma remoção cirúrgica facile do apêndice (remendo caecal) em um rato seguido pela indução do cancro colorretal da doença de entranhas inflamatório-associado. Este modelo murino do apendicectomia permite a investigação do papel biológico do apêndice na patogénese da doença gastrintestinal humana.

Abstract

O apêndice humano foi recentemente implicado para desempenhar papéis biológicos importantes na patogénese de várias doenças complexas, tais como câncer colorretal, doença inflamatória intestinal, e doença de Parkinson. Para estudar a função do apêndice, um modelo de apendicectomia Murina associada à doença intestinal foi estabelecido e seu protocolo passo a passo é descrito aqui. Este relatório introduz um protocolo facile para a remoção caecal do remendo nos ratos seguidos pela indução química do cancro colorretal colite-associado crônico usando uma combinação de sódio do sulfato do dextrano (DSS) e do azoximetano (Aom). As pilhas específicas de IgA e a concentração de IgA foram reduzidas significativamente em cima da remoção do remendo caecal nos ratos C57BL/6 masculinos comparados àqueles no grupo Sham. Simultaneamente administrar 2% DSS e AOM resultaram em quase 80% de sobrevida de camundongos em grupos de Sham e apendicectomia sem perda significativa de peso corporal. Os resultados histológicos confirmaram a inflamação relativa ao cólon e os graus diferentes de adenocarcinoma. Este modelo pode ser usado para o estudo do papel funcional do apêndice em manter a homeostase da microbiota do intestino e a patogénese da colite e das malignidades do intestino, assim como para o desenvolvimento potencial de terapias de segmentação da droga.

Introduction

A apendicectomia clínica é um procedimento cirúrgico padrão que envolve a remoção do apêndice principalmente devido à inflamação (por exemplo, apendicite)^1,2,3. No entanto, a função biológica do apêndice humano vermiforme permanece controversa^4,5,6. O apêndice foi considerado como um remanescente vestigial que projeta-se do ceco no intestino grosso. Até recentemente, estudos evolucionários, imunológicos, morfológicos e microbiológicos sugeriram que o apêndice pode possuir funções dis....

Protocol

Todos os procedimentos animais foram aprovados pelo Comitê institucional de cuidados e uso de animais da Universidade de Xi ' an Jiaotong (no. XJTULAC2019-1023).

1. apendicectomia de camundongos

1. Casa 8 – 10-week-old C57BL/6 ratos machos em um certificado específico-patógeno livre (SPF) ambiente para 1 semana antes da cirurgia.
2. Prepare os seguintes instrumentos cirúrgicos estéreis: um par de Microtesouras, um par de micro-fórceps, dois tamanhos (4-0 e 8-0) de suturas não absorvíveis esterilizadas, uma pena elétrica da coagulação com suporte da agulha, álcool médico de 75%, esfrega iodo-baseada ( por exemplo, entoiodine), ....

Results

Estabelecimento de modelo de apendicectomia murina

Este modelo de apendicectomia Murina do câncer colorretal associado à colite crônica pode ser gerado seguindo as etapas cirúrgicas e de indução seqüenciais, conforme ilustrado na Figura 1. As posições mais freqüentes do cécum estão na fossa ilíaca esquerda e direita seguida da linha média do abdome (Figura 2). A taxa bem sucedida de pré-localização do cécum antes da i.......

Discussion

Um modelo murino do apendicectomia do cancro colorretal colite-associado foi obtido usando etapas cirúrgicas com uma taxa de sobrevivência elevada nos ratos. Na maioria dos casos, desde que o cécum foi posicionado a parede abdominal (tabela suplementar 1, tabela suplementar 2, e Figura 2), era difícil prejudicar sua posição sem laparotomia. Neste protocolo cirúrgico, foi introduzido um passo fácil de tocar a colisão, e a avaliação quantitativa do local do cério também foi fo.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Azoximetano (AOM)	Sigma-Aldrich, Inc.	A5486
Sal de sódio de sulfato de dextrano (DSS)	MP Biomedicals, Inc.	160110
Entoiodo	Shanghai likon alta tecnologia desinfecção co. LTD	310102
paquímetro digital	Ningbo yuanneng trading co. LTD	4859263
4-0 Suturas de seda	Yuanlikang co. LTD	20172650032
8-0 Suturas de Prolene	Yuanlikang co. LTD	20172650032
Caneta de coagulação elétrica	Chuang mei medical equipment co. LTD	28221777292
seringa descartável 1ml	Shengguang medical products co. LTD	3262-2014
seringa descartável 10ml	Shengguang medical products co. LTD	3262-2014
75% Álcool medicinal	Shandong anjie tecnologia de desinfecção de alta tecnologia co. LTD	371402AAJ008
Sal	de sódio pentobarbitalSigma-Aldrich, Inc.	57-33-0
Solução salina fisiológica	Shandong qidu pharmaceutical co. LTD	H37020766
cotonete absorvente	Henan ruike medical co., LTD	RK051
Instrumentos cirúrgicos-oftálmicos	Jinzhong Shanghai co. LTD	WA3050