Encyclopedia of Experiments: Biology
É necessário ter uma assinatura JoVE para assistir este Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Börja med en parningstank, en tank med en avtagbar insats som gör att ägg kan falla igenom. Lägg till två manliga och tre kvinnliga vuxna fiskar i en delad parningstank på kvällen före embryosamling för att acklimatisera sig till varandra över natten.
Nästa morgon överför du fisken till en ny parningstank som innehåller systemvatten och tar bort avdelaren. Vänta i 15 till 30 minuter för att ge fisken tid att kompisera och leka.
Samla nu embryona och förvara dem i en petriskål som innehåller Hanks embryomedium.
Du kommer att observera flera utvecklingsfunktioner. Klyvning av blastodisc ger upphov till flera celler. Blastodermen tar formen av en inverterad kopp ovanför äggcellen.
Efter 24 timmar efter befruktning sorterar vi helt enkelt embryon efter total kroppslängd.
- Till att börja med, kulturembryon till tre månaders ålder, vilket är reproduktiv mognad. Segregera två vuxna han- och tre kvinnliga fiskar från önskad stam till uppdelade parningstankar med färskt systemvatten på kvällen före embryosamling. Följande morgon efter att lamporna tänds, ta bort avdelaren och låt fisken para sig naturligt tills embryon observeras i botten av tanken.
Samla embryon i 30 minuters intervall och separera Petri-rätter av embryomedium tills önskat antal samlas in. För att iscensätta embryona odlar de dem i grupper om 50 till 75 per 10 centimeter Petri-maträtt för att främja konsekvent utvecklingstid för alla embryon.
Mät embryoåldern med somitnummer efter segmentering fram till cirka 24 timmar efter befruktning, hpf, och separera embryona baserat på utvecklingsålder.
