וידאו ברזולוציה גבוהה של מעקב אחר תנועה של מבוגרים תסיסנית melanogaster
Summary
המחקר של התנהגות של תנועה מורכבת<em> תסיסנית melanogaster</em> תלוי היכולת לכמת שינויים בתנועה לטוס נתן. מאמר זה מדגים כיצד לעשות זאת באמצעות מערכת מעקב ברזולוציה גבוהה.
Abstract
זבובים לספק מודל חשוב ללימוד התנהגות מורכבת בשל שפע של כלים גנטיים לרשות החוקרים בתחום זה. לימוד התנהגות של תנועה ב<em> תסיסנית melanogaster</em> נשענת על היכולת להיות מסוגל לכמת שינויים בתנועה במהלך או בתגובה משימה מסוימת. מסיבה זו, ברזולוציה גבוהה מערכת מעקב וידאו, כמו זה אנו מתארים במאמר זה, הוא כלי בעל ערך למדידת תנועה בזמן אמת. פרוטוקול שלנו כרוכה בשימוש הדופק אוויר הראשונית לשבור את המומנטום זבובים, ואחריה תקופת הצילומים לשלושים השני חדר מרובע. תוכנית המעקב לאחר מכן נעשה שימוש כדי לחשב את מהירות מיידית של כל לטוס בתוך תא ב 10 במרווחים msec. תוכנת ניתוח אז זה הידור נתונים, יציאות מגוון רחב של פרמטרים כמו מהירות ממוצעת, מהירות מקסימלית, משך הזמן בתנועה, האצה וכו 'פרוטוקול זה יעסוק האכלה לניהול תקין של זבובים למשימות התנהגותי, טיפול זבובים ללא הרדמה או immobilization , הקמת סביבה מבוקרת, ולהפעיל את assay מתחילתו ועד סופו.
Protocol
Discussion
ב ההתקנה שלנו, דופק אוויר חזק בינוני transiently עוצר את התנועה לעוף. כאשר הדופק האוויר נגמר, הזבובים משתחררים ממצב זה נייחים locomote בדרך כלל, כפי שמוצג באיור 2. כי זה דופק האוויר ביעילות מסנכרן תנועה של האוכלוסייה, אנחנו משתמשים בו כדי להתחיל את הניסוי, כדי שנוכל ללמוד גם את ת?…
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות גרנט R01 GM54408 הוענק LC גריפית. ברצוננו להודות פרד וולף על כל העזרה שלו בעיצוב חדר מרובע שלנו בהקמת assay שלנו, פרנק מלו בחנות אוניברסיטת ברנדייס מכונה לבניית החדר שלנו, דן ולנטה וטים Lebestky לשיחות מועילות בנושאים ניתוח.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Square Chamber | Tool | Machine Shop | N/A | Design from Wolf et al. 20021 |
| Digital Camera | Camera | Sharp | ViewcamZ VL-23 | |
| Flowmeter | Tool | Cole Parmer | SY-32003-12 | |
| Light Box | Tool | DNASTAR, Inc. | Seq-Easy | |
| Charcoal Filter | Tool | Fisher Scientific | 09-744-37 | |
| DIAS 3.2 | Software | Soll technologies | N/A | www.solltechnologies.com |
References
- Wolf, F. W., Rodan, A. R., Tsai, L. T. High-Resolution Analysis of Ethanol-Induced Locomotor Stimulation in Drosophila. J Neurosci. 22 (24), 11035-11044 (2002).
- Soll, D. R. The use of computers in understanding how animal cells crawl. International review of cytology. 163, 43-104 (1995).
- Martin, J. R., Ollo, R. A new Drosophila Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase (Caki) is localized in the central nervous system and implicated in walking speed. The EMBO journal. 15 (8), 1865-1876 (1996).
- Levine, J. D., Funes, P., Dowse, H. B. Resetting the Circadian Clock by Social Experience in Drosophila melanogaster. Science. 298, 2010-2012 (2002).
