Vídeo de alta resolución de Seguimiento de la locomoción en adultos de Drosophila melanogaster
Summary
El estudio del comportamiento complejo en el aparato locomotor<em> Drosophila melanogaster</em> Depende de la capacidad de cuantificar los cambios en el movimiento de una mosca dado. Este artículo muestra cómo hacer esto con un sistema de rastreo de alta resolución.
Abstract
Las moscas proporcionar un importante modelo para estudiar el comportamiento complejo debido a la gran cantidad de herramientas genéticas disponibles para los investigadores en este campo. Estudiar el comportamiento del aparato locomotor en<em> Drosophila melanogaster</em> Depende de la capacidad para poder cuantificar los cambios en marcha durante o en respuesta a una tarea dada. Por esta razón, un sistema de video de alta resolución de seguimiento, como el que se describe en este documento, es una valiosa herramienta para la medición de la locomoción en tiempo real. El protocolo incluye el uso de un pulso de aire inicial para romper el impulso moscas, seguido por un período de rodaje treinta segundos en una cámara cuadrada. Un programa de seguimiento se utiliza para calcular la velocidad instantánea de cada vuelo dentro de la cámara en incrementos de 10 ms. Software de análisis a continuación, compila estos datos, y genera una serie de parámetros como la velocidad media, velocidad máxima, tiempo en movimiento, aceleración, etc Este protocolo discutirá la alimentación adecuada y el manejo de las moscas para las tareas de conducta, manejo de moscas sin anestesia o inmovilización , la creación de un ambiente controlado y la ejecución de la prueba de principio a fin.
Protocol
Discussion
En nuestra configuración, un impulso de aire moderadamente fuerte transitoriamente detiene el movimiento de volar. Cuando el pulso termina de aire, las moscas son liberados de este estado estacionario y moverse con normalidad, como se muestra en la figura 2. Debido a que este impulso de aire efectivamente se sincroniza la locomoción de la población, lo usamos para comenzar el juicio por lo que también podemos estudiar el inicio del movimiento después de un estímulo impulso sin precedentes. El ensayo puede, sin emb…
Acknowledgements
Este trabajo fue financiado por los Institutos Nacionales de Salud Grant R01 GM54408 otorgado a LC Griffith. Nos gustaría agradecer a Fred Wolf por toda su ayuda en el diseño de nuestra cámara cuadrada y la creación de nuestro ensayo, Frank Mello en el taller de máquinas para la construcción de la Universidad de Brandeis nuestra cámara, y Dan Valente y Lebestky Tim para las conversaciones útiles con respecto a temas de análisis.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Square Chamber | Tool | Machine Shop | N/A | Design from Wolf et al. 20021 |
| Digital Camera | Camera | Sharp | ViewcamZ VL-23 | |
| Flowmeter | Tool | Cole Parmer | SY-32003-12 | |
| Light Box | Tool | DNASTAR, Inc. | Seq-Easy | |
| Charcoal Filter | Tool | Fisher Scientific | 09-744-37 | |
| DIAS 3.2 | Software | Soll technologies | N/A | www.solltechnologies.com |
References
- Wolf, F. W., Rodan, A. R., Tsai, L. T. High-Resolution Analysis of Ethanol-Induced Locomotor Stimulation in Drosophila. J Neurosci. 22 (24), 11035-11044 (2002).
- Soll, D. R. The use of computers in understanding how animal cells crawl. International review of cytology. 163, 43-104 (1995).
- Martin, J. R., Ollo, R. A new Drosophila Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase (Caki) is localized in the central nervous system and implicated in walking speed. The EMBO journal. 15 (8), 1865-1876 (1996).
- Levine, J. D., Funes, P., Dowse, H. B. Resetting the Circadian Clock by Social Experience in Drosophila melanogaster. Science. 298, 2010-2012 (2002).
