アダルトキイロショウジョウバエのロコモーションの高解像度のビデオトラッキング
Summary
の複雑な運動挙動の研究<em>キイロショウジョウバエ</em>与えられたハエの動きの変化を定量化する能力に依存しています。この記事では、高分解能のトラッキングシステムを使用してこれを行う方法を示します。
Abstract
ハエは、この分野の研究者に利用可能な遺伝的なツールの過多に起因する複雑な挙動を研究するための重要なモデルを提供しています。における運動行動を研究して<em>キイロショウジョウバエ</em>中または特定のタスクに対応して動きの変化を定量化できるようにする能力に依存している。そのため、このような我々が本稿で説明する1つのような高解像度のビデオトラッキングシステムは、リアルタイムでの移動を測定するための貴重なツールです。我々のプロトコルは、正方形のチャンバー内の第三十二撮影期間が続くハエの勢いを、破るために初期の空気パルスの使用を含む。追跡プログラムは、10ミリ秒単位でチャンバー内の各フライの瞬時速度を計算するために使用されます。解析ソフトウェアは、このデータをコンパイルし、麻酔または固定化せずにハエを処理し、このプロトコルは、行動的なタスクのためにハエの適切な給餌と管理について議論するような平均速度、最高速度、運動で消費された時間、加速度、などのさまざまなパラメータを出力します、制御された環境をセットアップし、最初から最後までアッセイを実行する。
Protocol
Discussion
我々のセットアップでは、やや強い空気のパルスは、一時的にハエの動きを停止します。空気のパルスが終了すると、ハエは、図2に示すように、この定常状態と正常に動き回るから解放されています。この空気のパルスが効果的に人口の移動を同期化されるため、我々はまた勢い破りの刺激に続く運動の発症を学ぶことができるように試験を開始するために使用。開始後自発運動のパラメー…
Acknowledgements
この作業は、LCグリフィスに授与健康グラントR01 GM54408の国立研究所によってサポートされていました。私たちは、正方形のチャンバーを設計し、当社のチャンバーを構築し、そして分析の問題に関する有益な会話のためのDanバレンテとティムLebestkyのためのブランダイス大学の機械工場弊社のアッセイ、フランクメロのセットアップのすべての彼の助けのためにフレッドウルフに感謝します。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Square Chamber | Tool | Machine Shop | N/A | Design from Wolf et al. 20021 |
| Digital Camera | Camera | Sharp | ViewcamZ VL-23 | |
| Flowmeter | Tool | Cole Parmer | SY-32003-12 | |
| Light Box | Tool | DNASTAR, Inc. | Seq-Easy | |
| Charcoal Filter | Tool | Fisher Scientific | 09-744-37 | |
| DIAS 3.2 | Software | Soll technologies | N/A | www.solltechnologies.com |
References
- Wolf, F. W., Rodan, A. R., Tsai, L. T. High-Resolution Analysis of Ethanol-Induced Locomotor Stimulation in Drosophila. J Neurosci. 22 (24), 11035-11044 (2002).
- Soll, D. R. The use of computers in understanding how animal cells crawl. International review of cytology. 163, 43-104 (1995).
- Martin, J. R., Ollo, R. A new Drosophila Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase (Caki) is localized in the central nervous system and implicated in walking speed. The EMBO journal. 15 (8), 1865-1876 (1996).
- Levine, J. D., Funes, P., Dowse, H. B. Resetting the Circadian Clock by Social Experience in Drosophila melanogaster. Science. 298, 2010-2012 (2002).
