زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر
Summary
هنا ، نحن تصف إجراء جراحة لزرع القلب الأنسجة المهندسة في الأذينية البطينية (AV) الاخدود من الفئران لويس الكبار.
Abstract
جراحة القوارض غالبا ما يشكل عنصرا هاما في تقييم جدوى الأنسجة هندسيا. يمكن تنفيذ مجموعة واسعة من العمليات الجراحية في الفئران المختبرية المشتركة أو الفئران ، وهذه كثيرا ما يكون بمثابة خطوة وسيطة بين التجارب بين كبار مقاعد البدلاء والكبيرة التجارب على الحيوانات أو التجارب على الانسان. بالنظر إلى أن القوارض توفير نظام النموذج المعمول بها ، فعالة من حيث التكلفة ، وذات الصلة من الناحية الفسيولوجية ، والتي لاختبار تركيبات جديدة من المواد السقالات والخلايا ، فهي مناسبة تماما وخاصة القلب والأوعية الدموية للدراسات هندسة الأنسجة. في الوقت الحاضر ، ونحن تصف إجراء جراحة القلب المفتوح لزراعة الأنسجة المهندسة التي تحتوي على خلايا مولدة للعضل السلف في الأذينية البطينية (AV) تلم قلب الفئران. وتهدف هذه الغرسات لإنشاء قناة الكهربائية بين الأذين الأيمن والبطين الأيمن مع الهدف النهائي المتمثل في توفير العلاج البديل لزرع جهاز تنظيم ضربات القلب التقليدية في طب الأطفال المرضى مع كتلة القلب الكامل [1]. يتم زرع الأنسجة المهندسة في الأخدود – AV عن طريق بضع الصدر. لأغراضنا ، لويس لتخدير الفئران والتهوية جراحية للحفاظ على الضغط الهوائي الإيجابي أثناء إجراء العمليات الجراحية ومعقمة. يتم تنفيذ هذا النهج إلى القلب من قبل بضع الصدر الحق من خلال شق انتيرو – الجانبية في ال 5<sup> عشر</sup> الوربية الفضاء. يتم إصلاح بناء الأنسجة في الأخدود AV باستخدام واحدة 7-0 وخياطة Prolene المتمركزة بين البطين الأيمن والأذين في الجزء البطني للقلب. تتم إزالة النخاب جزئيا للسماح للاتصال مباشر بين خلايا عضلة القلب المتلقي وتلك الواردة في النسيج هندسيا. بعد زرع ، يتم إغلاق جدار الصدر في الطبقات ، هو إجلاء أي استرواح الصدر ، وextubated الحيوان ومعاملته مسكن.
Protocol
Discussion
لتحقيق نتيجة إيجابية لعملية جراحية ، من الأهمية بمكان intubate صحيح وتهوية جراحية الحيوان. إذا كان مخدرا ببساطة الفئران ، وسمحت للتنفس من تلقاء أنفسهم ، وسوف تنهار حتما كلا الرئتين ، بينما يتم فتح القفص الصدري بسبب الجنبة شيوعا في القوارض. قبل أن يغلق في الصدر ، أي استروا…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ويدعم هذا العمل عن طريق المنح البحثية من المعاهد الوطنية للصحة (HL068915 ؛ HL088206) والمساهمات للصندوق التوصيل القلب في مستشفى بوسطن للأطفال.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 7×4 Thermo Pad 4/box | Equipment | Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada | MODEL 704R | |
| Inspira ASV Ventilator | Equipment | Harvard Apparatus, Holliston, MA 01746 USA | ||
| Handheld Pulse Oximeter | Equipment | Nellcor, Boulder, CO 80301 USA | N20PA | |
| Retractor | Equipment | Roboz, Gaithersburg, MD 20898 USA | RS-6514 | |
| Isoflurane (Forane) | Reagent | Baxter | 1001936040 | |
| Ketamine HCl | Reagent | HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 | RL-0065 | |
| Xylazine (AnaSed) | Reagent | Lloyd | LB15705A | |
| Buprenorphine HCL Inject | Reagent | Bedford Labs, Bedford, OH 44146 USA | Div-BUP-P00 | |
| Bupivacaine 0.25% | Reagent | HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 |
References
- Choi, Y. H. Cardiac conduction through engineered tissue. Am J Pathol. 169, 72-85 (2006).
- Shin, J. W. Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg. 107, 1587-1591 (2008).
- Horstick, G. Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation. Am J Physiol. 276, H472-H479 (1999).
