Die Implantation von Engineered Tissue in der Ratte Herz
Summary
Hier beschreiben wir eine herzchirurgische Verfahren gezüchteten Gewebe in der atrioventrikulären (AV)-Nut eines Erwachsenen Lewis Ratte Implantat.
Abstract
Nager Operation ist oft ein wichtiger Bestandteil bei der Beurteilung der Nützlichkeit von technischen Geweben. Eine Vielzahl von chirurgischen Verfahren können in gemeinsamen Labor Ratten oder Mäusen durchgeführt werden und diese sehr häufig als ein Zwischenschritt zwischen Tisch-Experimente und große Tierversuche oder Versuche am Menschen dienen. Da die Nagetiere eine etablierte, kostengünstige und physiologisch-relevanten Modellsystem, in dem neuartige Kombinationen von Gerüsten Materialien und Zellen zu testen bieten, eignen sie sich besonders für Herz-Kreislauf-Tissue-Engineering-Studien gut geeignet. Derzeit stellen wir eine am offenen Herzen chirurgische Verfahren entwickelt, Gewebe mit myogenen Vorläuferzellen in der atrioventrikulären (AV) Nut einer Ratte Herz zu implantieren. Diese Implantate sollen eine elektrische Leitung zwischen dem rechten Vorhof und die rechte Herzkammer mit dem ultimativen Ziel, eine alternative Behandlung zu konventionellen Schrittmacher-Implantation bei pädiatrischen Patienten mit komplettem AV-Block [1] zu schaffen. Die gezüchteten Gewebe ist in der AV-Nut mittels einer Thorakotomie implantiert. Für unsere Zwecke sind Lewis-Ratten betäubt und invasiv beatmet, um positive Atemwegsdruck während des sterilen OP-Verfahren aufrecht zu erhalten. Der Ansatz des Herzens wird durch ein Recht Thorakotomie durch eine anterolaterale Inzision am 5 durchgeführt<sup> Th</sup> Interkostalraum. Das Gewebe Konstrukt ist in der AV-Nut mit einem einzigen 7-0 Prolene Naht fixiert und positioniert zwischen dem rechten Ventrikel und Atrium am ventralen Teil des Herzens. Das Epikard ist teilweise entfernt, um den direkten Kontakt zwischen dem Empfänger Herzmuskelzellen und die in der gezüchteten Gewebe enthalten kann. Nach der Implantation, der Brustwand wird schichtweise verschlossen ist jede Pneumothorax evakuiert, und das Tier extubiert und mit Analgetikum.
Protocol
Discussion
Für ein positives Ergebnis der Operation ist es wichtig, richtig zu intubieren und invasiv lüften das Tier. Wenn die Ratte einfach sediert ist und erlaubt, sich spontan zu atmen, werden beide Lungen unweigerlich zusammenbrechen, während der Thorax durch gemeinsame Pleura in Nagetieren geöffnet wird. Vor dem Schließen der Brust, muss jede Pneumothorax vollständig eliminiert werden und die Lunge voll ausgebaut, um Atelektasen zu reduzieren. Andernfalls wird der Entwöhnung vom Beatmungsgerät und Recovery nicht erfo…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Und Beiträge an die Reizleitung Fund an der Kinderklinik Boston; Diese Arbeit wird durch Forschungsmittel von den National Institutes of Health (HL088206 HL068915) unterstützt.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 7×4 Thermo Pad 4/box | Equipment | Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada | MODEL 704R | |
| Inspira ASV Ventilator | Equipment | Harvard Apparatus, Holliston, MA 01746 USA | ||
| Handheld Pulse Oximeter | Equipment | Nellcor, Boulder, CO 80301 USA | N20PA | |
| Retractor | Equipment | Roboz, Gaithersburg, MD 20898 USA | RS-6514 | |
| Isoflurane (Forane) | Reagent | Baxter | 1001936040 | |
| Ketamine HCl | Reagent | HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 | RL-0065 | |
| Xylazine (AnaSed) | Reagent | Lloyd | LB15705A | |
| Buprenorphine HCL Inject | Reagent | Bedford Labs, Bedford, OH 44146 USA | Div-BUP-P00 | |
| Bupivacaine 0.25% | Reagent | HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 |
References
- Choi, Y. H. Cardiac conduction through engineered tissue. Am J Pathol. 169, 72-85 (2006).
- Shin, J. W. Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg. 107, 1587-1591 (2008).
- Horstick, G. Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation. Am J Physiol. 276, H472-H479 (1999).
