L'impianto di ingegneria tessutale nel Cuore Rat
Summary
Qui, descriviamo una procedura chirurgica per l'impianto cardiaco di ingegneria tessutale nella atrio-ventricolare (AV)-solco di un ratto adulto Lewis.
Abstract
Chirurgia roditore è spesso una componente importante nel valutare l'utilità dei tessuti ingegnerizzati. Una vasta gamma di procedure chirurgiche possono essere eseguite su ratti di laboratorio comuni o nei topi e questi molto spesso servono come un passaggio intermedio tra banco esperimenti e test sugli animali di grandi dimensioni o sperimentazione umana. Dato che i roditori fornire un sistema modello stabilito, conveniente, e fisiologicamente rilevanti in cui sperimentare nuove combinazioni di materiali ponteggi e cellule, sono particolarmente adatti per gli studi di ingegneria dei tessuti cardiovascolari. Attualmente, ci descrivono un cuore aperto procedura chirurgica per l'impianto di ingegneria tessutale che contiene cellule progenitrici miogeniche nel atrio-ventricolare (AV) solco di un cuore di ratto. Questi impianti hanno lo scopo di creare un condotto elettrico tra l'atrio destro e ventricolo destro con l'obiettivo finale di fornire un trattamento alternativo a impianto di pacemaker convenzionale in pazienti pediatrici con blocco cardiaco completo [1]. L'ingegneria tessutale è impiantato nel AV-scanalatura per mezzo di una toracotomia. Per i nostri scopi, i ratti Lewis sono anestetizzati e invasivo ventilato per mantenere la pressione positiva delle vie aeree durante la procedura chirurgica sterile. L'approccio verso il cuore viene eseguito da una toracotomia destra attraverso uno antero-laterale incisione presso i 5<sup> °</sup> Spazio intercostale. Il costrutto tessuto è stato risolto nel solco AV utilizzando un unico 7-0 sutura Prolene e posizionato tra il ventricolo destro e atrio nella porzione ventrale del cuore. L'epicardio è parzialmente rimosso per consentire il contatto diretto tra le cellule del miocardio destinatario e quelle contenute nei tessuti ingegnerizzati. Dopo l'impianto, la parete toracica è chiuso a strati, ogni pneumotorace viene evacuato, e l'animale è estubato e trattato con analgesici.
Protocol
Discussion
Per un esito favorevole alla procedura chirurgica, è fondamentale per intubare correttamente e invasivo ventilare l'animale. Se il ratto è semplicemente sedato e ha permesso di respirare spontaneamente, entrambi i polmoni inevitabilmente crollare mentre il torace è aperto a causa della pleura comuni nei roditori. Prima di chiudere il petto, ogni pneumotorace deve essere completamente eliminato ei polmoni completamente espansa per ridurre atelettasia. Altrimenti, lo svezzamento dal respiratore e recupero sarà suc…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è sostenuto da borse di ricerca dal National Institutes of Health (HL068915; HL088206) e contributi al Fondo di conduzione cardiaca presso il Children Hospital di Boston.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 7×4 Thermo Pad 4/box | Equipment | Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada | MODEL 704R | |
| Inspira ASV Ventilator | Equipment | Harvard Apparatus, Holliston, MA 01746 USA | ||
| Handheld Pulse Oximeter | Equipment | Nellcor, Boulder, CO 80301 USA | N20PA | |
| Retractor | Equipment | Roboz, Gaithersburg, MD 20898 USA | RS-6514 | |
| Isoflurane (Forane) | Reagent | Baxter | 1001936040 | |
| Ketamine HCl | Reagent | HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 | RL-0065 | |
| Xylazine (AnaSed) | Reagent | Lloyd | LB15705A | |
| Buprenorphine HCL Inject | Reagent | Bedford Labs, Bedford, OH 44146 USA | Div-BUP-P00 | |
| Bupivacaine 0.25% | Reagent | HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 |
References
- Choi, Y. H. Cardiac conduction through engineered tissue. Am J Pathol. 169, 72-85 (2006).
- Shin, J. W. Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg. 107, 1587-1591 (2008).
- Horstick, G. Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation. Am J Physiol. 276, H472-H479 (1999).
