Summary

Implantation av vävnadstekniska i Rat hjärta

Published: June 24, 2009
doi:

Summary

Här beskriver vi en hjärt kirurgiskt ingrepp för att implantat vävnadstekniska i atrioventrikulärt (AV)-spår av en vuxen Lewis råtta.

Abstract

Gnagare kirurgi är ofta en viktig komponent i att bedöma nyttan av tekniska vävnader. Ett brett utbud av kirurgiska ingrepp kan utföras gemensamt laboratorium råttor eller möss och dessa ganska ofta fungera som ett mellansteg mellan bänkbaserade experiment och stora djurförsök eller försök på människa. Med tanke på att gnagare är en etablerad, kostnadseffektiv, och fysiologiskt relevant modellsystem för att testa nya kombinationer av byggnadsställningar material och celler, de är särskilt väl lämpade för kardiovaskulära studier tissue engineering. För närvarande beskriver vi en öppen hjärt-kirurgiskt ingrepp för implantat vävnadstekniska innehåller myogenic stamceller i atrioventrikulärt (AV) spår av en råtta hjärta. Dessa implantat är avsedda att skapa en elektrisk ledning mellan höger förmak och höger kammare med det slutliga målet att ge en alternativ behandling med konventionell pacemaker implantation hos barn med komplett hjärtblock [1]. Den vävnadstekniska är implanteras i AV-spår med hjälp av en torakotomi. För våra syften, Lewis råttor är bedövad och invasivt ventilerade för att upprätthålla CPAP under sterila kirurgiska ingreppet. Den metod som till hjärtat utförs av en rätt torakotomi genom en anterolaterala snitt vid 5<sup> Th</sup> Interkostalrummet. Vävnaden konstruera är fast i AV-spåret med en enda 7-0 Prolene sutur och placeras mellan höger kammare och förmak vid ventrala delen av hjärtat. Den epikardiet är delvis bort för att möjliggöra direkt kontakt mellan mottagarens hjärtmuskelceller och de som finns i vävnadstekniska. Efter implantation är bröstväggen stängdes i lager är alla pneumothorax evakueras, och djuret extubated och behandlas med smärtstillande.

Protocol

Del 1: Induktion av allmän anestesi En 200-250 g Lewis råttan är sövda med 50 mg / kg ketamin och 4 mg / kg Xylazine injiceras med en 30 G nål i intraperitoneal hålighet. Den övre delen av buken och höger bröst klipps för att ta bort hår och snittet platsen rengöras med 70% etanol och därefter en povidon-jod aktuell antiseptisk lösning. Djuret är intuberade endotracheally med en 16 g intravenös kateter ansluten till ett litet djur andningsskydd (Harvard Apparatus). Andningsskyddet ä…

Discussion

För ett positivt resultat för det kirurgiska ingreppet är det viktigt att korrekt intuberas och invasivt ventilera djuret. Om råttan är helt enkelt lugnande preparat och tillåtas att spontant andas, kommer båda lungorna kollapsar oundvikligen medan bröstkorgen öppnas på grund av gemensamma lungsäck hos gnagare. Innan du stänger bröstet, behöver någon pneumothorax att vara helt elimineras och lungorna fullt utbyggt att minska atelektas. Annars kommer avvänjning från respirator och återhämtning misslyck…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Detta arbete stöds av forskningsanslag från National Institutes of Health (HL068915, HL088206) och bidrag till hjärtöverledning fonden vid barnsjukhuset Boston.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
7×4 Thermo Pad 4/box Equipment Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada MODEL 704R  
Inspira ASV Ventilator Equipment Harvard Apparatus, Holliston, MA 01746 USA    
Handheld Pulse Oximeter Equipment Nellcor, Boulder, CO 80301 USA N20PA  
Retractor Equipment Roboz, Gaithersburg, MD 20898 USA RS-6514  
Isoflurane (Forane) Reagent Baxter 1001936040  
Ketamine HCl Reagent HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 RL-0065  
Xylazine (AnaSed) Reagent Lloyd LB15705A  
Buprenorphine HCL Inject Reagent Bedford Labs, Bedford, OH 44146 USA Div-BUP-P00  
Bupivacaine 0.25% Reagent HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045    
check_url/1139?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Sill, B., Alpatov, I. V., Pacak, C. A., Cowan, D. B. Implantation of Engineered Tissue in the Rat Heart. J. Vis. Exp. (28), e1139, doi:10.3791/1139 (2009).

View Video