Summary

Catheterisatie van de intestinale Loops bij herkauwers

Published: June 11, 2009
doi:

Summary

Beschrijven we een nieuwe chirurgische methode voor catheterizing 'darm loops' in het ileum van schapen. Zodra de dieren hebben zich hersteld van een operatie en hebben opgeruimd antibiotica en pijnstillers, kunnen meerdere behandelingen direct worden gestort in lussen via de katheters.

Abstract

De darm is een complexe structuur die is niet alleen betrokken in de opname van voedingsstoffen, maar fungeert ook als een barrière tussen het individu en de buitenwereld. Als zodanig, de darm speelt een centrale rol in immunosurveillance en bescherming tegen darmpathogenen. Onderzoek naar intestinale fysiologie en immunologie vaak heeft 'darm loops' als een experimenteel model. De meerderheid van deze loop modellen zijn niet-inning chirurgische ingrepen die op korte termijn (<24 uur) veranderingen in de darm (1-3) te bestuderen. We hebben eerder een herstel van darm-lus model om specifiek te meten op lange termijn (<6 maanden) immunologische veranderingen in de darm van schapen na blootstelling aan vaccins, hulpstoffen, en virussen (4). Deze procedure gelokaliseerde behandelingen om een ​​specifieke 'lus', waardoor we dit deel van de darm monster. Een belangrijk nadeel van deze methode is de single window of opportunity om behandelingen (dwz op het moment van de operatie) te beheren. Bovendien kunnen monsters van zowel het darmslijmvlies en luminale inhoud alleen worden genomen bij de beëindiging van het project. Andere opvallende beperkingen van het bovenstaande model zijn dat de chirurgische manipulatie en noodzakelijke post-operatieve maatregelen (bijvoorbeeld de toediening van antibiotica en pijnstillers) direct kan de behandeling zelf en / beïnvloeden of wijzigen immuunsysteem, waardoor confounding resultaten. Daarom hebben we ons aangepast darm-lus model door het inbrengen van de lange termijn katheters in de lussen. Schapen volledig te herstellen van de procedure, en worden niet beïnvloed door de exteriorized katheters. Met name de vestiging van katheters in loops stelt ons in staat om meerdere behandelingen te introduceren over een langere periode, na herstel van een operatie en de klaring van geneesmiddelen toegediend tijdens de operatie en de postoperatieve periode.

Protocol

Experimentele procedure: Alle instrumenten worden geautoclaveerd, niet-autoclaveerbaar materialen worden gesteriliseerd in Germex koude sterilisatie oplossing voor een minimum van 10 minuten. Schapen zijn vooraf behandeld met acepromazine (0,05 mg / kg), glycopyrrolaat (0,005 mg / kg), en butorphanoltartraat (0,2 mg / kg) IM, en vertrok naar 15-20 minuten. De hals is geschoren en de huid operatief verwijderd. Zodra de halsader is gevisualiseerd, 0,1 ml van lidocaïne wordt geïnjecteerd SC…

Discussion

In deze procedure, konden we met succes katheters vestigen in de darm lussen opgericht in het ileum van schapen. Door vast te houden aan de strenge post-operatieve zorg, dieren zich snel hersteld van de procedure en de normale activiteiten hervat 5-7 dagen na de operatie. We hebben vastgesteld dat de oprichting van katheters in lussen niet intestinale mucosale of het immuunsysteem (gegevens niet getoond) beïnvloeden en dieren kunnen leven gedurende minstens 8 weken na de operatie. Deze procedure stelt ons in staat om m…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Het onderzoek kon niet worden voltooid zonder de inzet en inspanningen van vele personen aan de landbouw en Agri-Food Canada Research Centre, Lethbridge, Alberta, Canada. In dit verband, danken wij: Tara Shelton voor pre-en post-operatieve zorg van de dieren, chirurgische voorbereiding en anesthesiologie, analyse van de monsters, en hulp met video imaging; Randy Wilde en Estela Costa voor pre-en post-operatieve zorg; Jenny Gusse voor monsteranalyse, Byron Lee voor de trocar beeld, en Brian Egland voor schapen veeteelt. We danken ook Brent Selinger (Department of Biological Sciences, Universiteit van Lethbridge) voor het leveren van video-apparatuur en advies, alsmede andere bijstand (dat wil zeggen de uitvoerende productie), en het Curriculum Re-Development Centre, Universiteit van Lethbridge voor videografie expertise. Dit onderzoek werd mede ondersteund door subsidies van de Advanced Foods and Materials Network (GDI), het Canada-Alberta Beef Industry Development Fund (GDI), en landbouw en Agri-Food Canada (GDI en JPK).

Materials

Category / Item NumberCompanyCatalogue
Surgeon supplies
Surgical glovesWDDCa103091
Surgical maskWDDCMAX53013
Surgical gownCDMVb3365
OB ApronWDDC900062
Surgical capWDDC903271
EZ Scrub brushWDDCBDC377479
Anesthesia and drugs
Anesthetic machineBoyle
SodasorbWDDC108638
LaryngoscopeWDDC
Laryngoscope blade (Miller blade #4)WDDC902667
Endotracheal tube (7.0 – 8.5 mm)WDDC
Lidocaine endotracheal sprayWDDC103364
AcepromazineWDDCAUS01020
GlycopyrrolateWDDCSAB2880
Butorphanol tartrateWDDCAYE304541
DiazepamWDDCsab790
Thiopental sodiumWDDC103508
Epinephrine hydrochlorideWDDC103856
DoxapramStrathcona Pharmacy
IsofluraneWDDC100339
HemostamWDDC103857
FlunixinWDDCsch140100
EnrofloxacinWDDChll0049
MetronidazoleWDDC101653
AmpicillinWDDCNOV67185-6
CefazolinWDDCnov69397
Surgical equipment and supplies
ElectroscapelMacanMV8
Heating matKanePHMD-48
Stomach tube (Nalgene tubing 5/16″ ID)Fisher Scientific
Needle driverWDDC108338
Addison brown forcepWDDC911075
Rat tooth forcepCDMV5275
Kelly forcepWDDC901133
Mosquito hemostatWDDC108471
Carmalt forcepWDDC901225
Scalpel handleWDDC900285
Scalpel blade #22WDDC900511
Metzenbaum scissorWDDC901166
Sharp-sharp scissorWDDC108264
Towel clampWDDC901213
Allis tissue forcepWDDC901201
Doyen’s forcepWDDC904226
Stainless steel bowlWDDC903601
Stainless steel trocar (curved)Local supplier
Catheter introducerWDDC11440
Surgical towelCDMV7972
Disposable drapeWDDC900035
Steri drapeCDMV2323
Drape (40 x 40 cm)CDMV8358
Surgical drape (7″ x 11 ¼” opening)CDMV2694
Vicryl (2-0)WDDCJJMJ333H
Silk 2-0WDDC105248
Catgut #3WDDCCSL547-2070
Supramid #1WDDCCSL547-3040
Needles (cutting and non-cutting)WDDC
Catheter
Silastic tubing (0.040″ ID, 0.085″ OD)Fisher Scientific11-189-15D
Orbeseal ointmentWDDC106344
Clear silicone (732 multi-purpose sealant)Local supplier
Blunt end needleWDDC905035
Marker (permanent industrial)Local supplier
Catheter pouch (constructed of Elastoplast 7.5 cm)WDDC104094
Bandages
Hospital tape (2″)WDDC103842
Hospital tape (1″)WDDCVLMRENF20
Gauze sponge 4×4WDDC107551
Gauze clingWDDC107633
Elastoplast 7.5cmWDDC104094
Elastoplast rippable bandageWDDC104093
Needles and syringes
Syringe (60 ml)WDDC104004
Syringe (10 ml)WDDCbdc301604
25G NeedleWDDCBDC305122
20G NeedleWDDCBDC305175
18G NeedleWDDC903353
Intravenous
Intracath IV catheter (16G 8″)WDDCbdc3831621
IV administration set (10 drop)WDDC101797
0.9% NaCl solutionWDDCBAXJB1322P
Plasmalyte 148 solutionWDDCBAXJB2534
DextroseWDDCMCT60190
Peristaltic pumpCole Parmer7524-10
Livestock identification tag cementLocal supplier
Sanatizers / disinfectants
Germex solutionWDDCmtc60270
Isopropyl alcoholWDDC104590
Stanhexidine cleanserWDDC109248
Prepodyne solutionWDDC105710
Prepodyne scrubWDDC105711

aWestern Drug Distribution Center LTD, Edmonton, AB.

bThe Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE.

References

  1. Vidal, J. E., McClane, B. A., Saputo, J., Parker, J., Uzal, F. A. Effects of Clostridium perfringens beta-toxin on the rabbit small intestine and colon. Infect. Immun. 76, 4396-4404 (2008).
  2. Santos, R. L., Zhang, S., Tsolis, R. M., Baumler, A. J., Adams, L. G. Morphologic and molecular characterization of Salmonella typhimurium infection in neonatal calves. Vet. Pathol. 39, 200-215 (2002).
  3. Uzzau, S., Leori, G. S., Petruzzi, V., Watson, P. R., Schianchi, G., Bacciu, D., Mazzarello, V., Wallis, T. S., Rubino, S. Salmonella enterica serovar-host specificity does not correlate with the magnitude of intestinal invasion in sheep. Infect. Immun. 69, 3092-3099 (2001).
  4. Gerdts, V., Uwiera, R. R. E., Mutwiri, G. K., Wilson, D. J., Bowersock, T., Kindane, A., Babiuk, L. A., Griebel, P. J. Multiple intestinal ‘loops’ provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses. J. Immunol. Methods. 256, 19-33 (2001).
  5. Greibel, P. J., Davis, W. C., Reynolds, J. D. An analysis of the growth and differentiation of b cells isolated from follicles from ileal Peyer’s patch of sheep. Immunology. 75, 601-607 (1992).
  6. Motyka, G., Greibel, P. J., Reynolds, J. D. Agents that activate protein kinase C resue sheep ileal Peyer’s patch B cells from apoptosis. Eur. J. Immunol. 23, 1314-1321 (1993).
check_url/1301?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Uwiera, R. R. E., Kastelic, J. P., Inglis, G. D. Catheterization of Intestinal Loops in Ruminants. J. Vis. Exp. (28), e1301, doi:10.3791/1301 (2009).

View Video