Summary

反芻動物の腸ループのカテーテル

Published: June 11, 2009
doi:

Summary

我々は羊の回腸内に"腸のループを"catheterizingのための新しい手術方法を説明します。一度動物は手術から回復し、抗生物質と鎮痛薬をクリアして、複数の治療は、カテーテルを介してループに直接堆積することができます。

Abstract

腸だけでなく、栄養素の吸収に関与している複雑な構造ですが、個人と外界との間のバリアとして機能します。このように、腸は腸内病原体から免疫学的監視と保護の中心的役割を担っています。調査腸の生理学および免疫学は、一般的に実験モデルとしての"腸のループ"を採用しています。これらのループのモデルの大半は、腸の短期(<24時間)の変更を(1-3)勉強以外の回復外科手術です。我々は以前、特にワクチン、アジュバント、およびウイルス(4)への暴露後に羊の腸での長期(<6カ月)免疫学的変化を測定するために回復腸管ループモデルを作成しました。特定の"ループ"に、この手順は、ローカライズされた治療法、私たちは腸のこの領域をサンプリングすることができます。この方法の大きな欠点は、治療を(手術の時、すなわち)管理するための機会の一つのウィンドウです。さらに、腸の粘膜と内腔の内容の両方のサンプルはプロジェクトの終了時に撮影することができます。上記モデルの他の顕著な限界は、外科的操作と必要な術後の対策が(抗生物質と鎮痛剤の例管理)を直接治療自体及び/に影響を与えるか、それによって交絡結果を免疫機能を変更できることです。したがって、我々はループに長期的なカテーテルを挿入することにより、私たちの腸のループのモデルを修正。羊は、プロシージャから完全に回復し、体外カテーテルによる影響を受けません。特に、ループ内でのカテーテルの設置は、私たちは手術中に投与した薬物の手術とクリアランスからの回復と術後期間の後、間隔を長く、複数の治療法を導入することができます。

Protocol

実験手順: すべての楽器は、オートクレーブ滅菌であり、非autoclaveable材料は、10分の最低Germexコールド消毒液で滅菌されています。 羊は、アセプロマジン(0.05 mg / kg体重)、グリコピロレート(0.005 mg / kgの)、および酒石酸ブトルファノール(0.2 mg / kg)をIMでの事前薬用であり、15〜20分間放置。 首を剃毛し、皮膚外科的にスクラブされています。頸静脈が可視化され…

Discussion

この手順では、我々が正常に羊の回腸内に確立された腸管ループ内でカテーテルを確立することができた。厳格な術後ケアに従うことで、動物が急速にプロシージャから回復し、5〜7日手術後に正常な活動を再開した。我々は、ループ内カテーテルの設置は、腸粘膜や免疫機能を(データは示さず)には影響しないと動物が手術後、少なくとも8週間のために生きることができることが判明。?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

研究は、献身と農務農産食品カナダ研究センター、レスブリッジ、アルバータ州、カナダで多くの人々の努力なしで完了していない可能性があります。その意味で、我々は感謝:前と術後の動物のケア、手術の準備、そして麻酔、試料の分析、およびビデオ画像処理の支援のためのタラシェルトン、ランディワイルドとエステラコスタリカ前と術後ケアのための;サンプル分析のためのジェニーGusse、トロカールの画像のためのバイロンリー、および羊の飼育のためのブライアンEgland。我々はまた、ビデオ機器やアドバイスだけでなく、その他の援助を(すなわちエグゼクティブ生産)提供するためのブレントSelingerを(生物科学科、レスブリッジ大学)感謝、そしてカリキュラムの再開発センター、ビデオ撮影の専門知識のためのレスブリッジ大学。この研究は、高度な食品材料のネットワーク(GDI)、カナダ – アルバータ州の牛肉産業開発基金(GDI)、および農務農産食品カナダ(GDIとJPK)からの補助金によって部分的にサポートされていました。

Materials

Category / Item NumberCompanyCatalogue
Surgeon supplies
Surgical glovesWDDCa103091
Surgical maskWDDCMAX53013
Surgical gownCDMVb3365
OB ApronWDDC900062
Surgical capWDDC903271
EZ Scrub brushWDDCBDC377479
Anesthesia and drugs
Anesthetic machineBoyle
SodasorbWDDC108638
LaryngoscopeWDDC
Laryngoscope blade (Miller blade #4)WDDC902667
Endotracheal tube (7.0 – 8.5 mm)WDDC
Lidocaine endotracheal sprayWDDC103364
AcepromazineWDDCAUS01020
GlycopyrrolateWDDCSAB2880
Butorphanol tartrateWDDCAYE304541
DiazepamWDDCsab790
Thiopental sodiumWDDC103508
Epinephrine hydrochlorideWDDC103856
DoxapramStrathcona Pharmacy
IsofluraneWDDC100339
HemostamWDDC103857
FlunixinWDDCsch140100
EnrofloxacinWDDChll0049
MetronidazoleWDDC101653
AmpicillinWDDCNOV67185-6
CefazolinWDDCnov69397
Surgical equipment and supplies
ElectroscapelMacanMV8
Heating matKanePHMD-48
Stomach tube (Nalgene tubing 5/16″ ID)Fisher Scientific
Needle driverWDDC108338
Addison brown forcepWDDC911075
Rat tooth forcepCDMV5275
Kelly forcepWDDC901133
Mosquito hemostatWDDC108471
Carmalt forcepWDDC901225
Scalpel handleWDDC900285
Scalpel blade #22WDDC900511
Metzenbaum scissorWDDC901166
Sharp-sharp scissorWDDC108264
Towel clampWDDC901213
Allis tissue forcepWDDC901201
Doyen’s forcepWDDC904226
Stainless steel bowlWDDC903601
Stainless steel trocar (curved)Local supplier
Catheter introducerWDDC11440
Surgical towelCDMV7972
Disposable drapeWDDC900035
Steri drapeCDMV2323
Drape (40 x 40 cm)CDMV8358
Surgical drape (7″ x 11 ¼” opening)CDMV2694
Vicryl (2-0)WDDCJJMJ333H
Silk 2-0WDDC105248
Catgut #3WDDCCSL547-2070
Supramid #1WDDCCSL547-3040
Needles (cutting and non-cutting)WDDC
Catheter
Silastic tubing (0.040″ ID, 0.085″ OD)Fisher Scientific11-189-15D
Orbeseal ointmentWDDC106344
Clear silicone (732 multi-purpose sealant)Local supplier
Blunt end needleWDDC905035
Marker (permanent industrial)Local supplier
Catheter pouch (constructed of Elastoplast 7.5 cm)WDDC104094
Bandages
Hospital tape (2″)WDDC103842
Hospital tape (1″)WDDCVLMRENF20
Gauze sponge 4×4WDDC107551
Gauze clingWDDC107633
Elastoplast 7.5cmWDDC104094
Elastoplast rippable bandageWDDC104093
Needles and syringes
Syringe (60 ml)WDDC104004
Syringe (10 ml)WDDCbdc301604
25G NeedleWDDCBDC305122
20G NeedleWDDCBDC305175
18G NeedleWDDC903353
Intravenous
Intracath IV catheter (16G 8″)WDDCbdc3831621
IV administration set (10 drop)WDDC101797
0.9% NaCl solutionWDDCBAXJB1322P
Plasmalyte 148 solutionWDDCBAXJB2534
DextroseWDDCMCT60190
Peristaltic pumpCole Parmer7524-10
Livestock identification tag cementLocal supplier
Sanatizers / disinfectants
Germex solutionWDDCmtc60270
Isopropyl alcoholWDDC104590
Stanhexidine cleanserWDDC109248
Prepodyne solutionWDDC105710
Prepodyne scrubWDDC105711

aWestern Drug Distribution Center LTD, Edmonton, AB.

bThe Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE.

References

  1. Vidal, J. E., McClane, B. A., Saputo, J., Parker, J., Uzal, F. A. Effects of Clostridium perfringens beta-toxin on the rabbit small intestine and colon. Infect. Immun. 76, 4396-4404 (2008).
  2. Santos, R. L., Zhang, S., Tsolis, R. M., Baumler, A. J., Adams, L. G. Morphologic and molecular characterization of Salmonella typhimurium infection in neonatal calves. Vet. Pathol. 39, 200-215 (2002).
  3. Uzzau, S., Leori, G. S., Petruzzi, V., Watson, P. R., Schianchi, G., Bacciu, D., Mazzarello, V., Wallis, T. S., Rubino, S. Salmonella enterica serovar-host specificity does not correlate with the magnitude of intestinal invasion in sheep. Infect. Immun. 69, 3092-3099 (2001).
  4. Gerdts, V., Uwiera, R. R. E., Mutwiri, G. K., Wilson, D. J., Bowersock, T., Kindane, A., Babiuk, L. A., Griebel, P. J. Multiple intestinal ‘loops’ provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses. J. Immunol. Methods. 256, 19-33 (2001).
  5. Greibel, P. J., Davis, W. C., Reynolds, J. D. An analysis of the growth and differentiation of b cells isolated from follicles from ileal Peyer’s patch of sheep. Immunology. 75, 601-607 (1992).
  6. Motyka, G., Greibel, P. J., Reynolds, J. D. Agents that activate protein kinase C resue sheep ileal Peyer’s patch B cells from apoptosis. Eur. J. Immunol. 23, 1314-1321 (1993).

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Cite This Article
Uwiera, R. R. E., Kastelic, J. P., Inglis, G. D. Catheterization of Intestinal Loops in Ruminants. J. Vis. Exp. (28), e1301, doi:10.3791/1301 (2009).

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