Twee-Foton Laser-Geïnduceerde Neurale Verwonding: Een Methode om Axon Degeneratie en Regeneratie in Drosophila Larven te observeren
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Li, D., et al. A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System. J.Vis. Exp. (2018).
Deze video beschrijft twee-foton laser ablatie van axonen in een Drosophila melanogaster larve en een voorbeeld protocol om letsel te induceren en beeld de verwonding site.
Protocol
Dit protocol is een fragment uit Li et al., A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System, J. Vis. Exp. (2018). 1. Twee-foton Letsel en Confocale Beeldvorming Microscoop setupOPMERKING: Voor dit experiment werd een confocale laserscanmicroscoop met een tweefotonenlaser gebruikt, maar ook andere systemen met een gelijkwaardige opstelling zijn voldoende. De twee-…
Representative Results
Figuur 1: Da neuron axon regeneratie in de periferie geeft klasse specificiteit weer. (A en B) Schematische tekening met de positie van de larven. (C) Schematische tekening van klasse III da neuronen. (D) Axonen van de klasse III da neuronen ddaF, gelabeld met 19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80/+, groeien niet opnieuw. (E) Schematische tekening van kla…
Materials
| Diethyl ether, ACS reagent, anhydrous | Acros Organics | AC615080010 | |
| Halocarbon 27 Oil | Genesee Scientific | 59-133 | |
| Propionic Acid | J.T.Baker | U33007 | |
| Cover Glasses: Rectangles | Fisher Scientific | 12-544-D | 50 mm X 22 mm |
| Zeiss LSM 880 laser scanning microscope | Zeiss | ||
| Zen software | Zeiss | ||
| Chameleon Ultra II | Coherent |
Cite This Article
Two-Photon Laser-Induced Neural Injury: A Method to Observe Axon Degeneration and Regeneration in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20108, doi: (2023).