Overview
C. 卵 子产卵行为可以为发育、生殖和解剖学研究提供重要信息。 该视频介绍了产卵检测的重要步骤,并展示了一个样本实验,其中药物被测试生殖毒性。
Protocol
李和康,测量化学物质对卡诺哈布迪炎电子教徒生长和繁殖的影响,J.维斯Exp。(2017).
1.C 伊莱甘斯蛋产分析
- 在含有 DMSO 或 etoposide 的 NGM 板上孵育年龄同步的卵子,持续 64 小时(第一次出生前),直到 20 °C 的年轻成人阶段。
注: 使用生长测量实验中的蠕虫是可选的。一起做生长测量和产卵检测很方便。 - 将5个成年蠕虫转移到新的NGM板中,不含化学品(条件1,在一定时间内进行化学处理,从卵子到年轻的成人阶段)或含有相同化学预处理的新NGM板(条件2,在整个实验期间连续接触化学品),然后孵育它们24小时。
注: 建议每次处理使用 3-5 个 NGM 板进行复制:这些复制品可用于统计分析。 - 转移到新的NGM板,如上所述,每天计算鸡蛋的数量。数一数爬走、死亡和内部孵化的蠕虫。
- 重复这些步骤,直到蠕虫不再产卵,通常在5天内。
- 计算每个盘子中每只蠕虫产卵的数量,并每天计算这些值5天,以确定产卵总数。
注:排除从计算中爬出并在内部孵化的蠕虫数量。
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Caenorhabditis elegans N2 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | Wild type | |
Dimethyl sulfoxide | Sigma, USA | D2650 | |
Escherichia coli OP50 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | ||
Etoposide | Sigma, USA | E1383 | |
35 × 10 mm Petri dish | SPL Life Sciences, South Korea | 10035 | |
Stereo microscope | Nikon, Japan | SMZ800N |