FITC-デキストラン摂食:C.エレガンスにおける腸透過性を定量化する方法
Published: April 30, 2023
Abstract
出典:ル、T.A.N.、他.細菌と化学物質がカエノハブディティス・エレガンスの腸透過性に及ぼす影響を測定する。J. ヴィス・エクス(2019).
このビデオでは、FITC標識デキストランをワームに供給することによって 、C.エレガンス 腸管腔の完全性を視覚化し、測定する方法を紹介します。 このプロトコルの例は、3,3′-ジインドリルメタン(DIM)処理および病原体供給ワームで行われたアッセイを示しています。
Protocol
このプロトコルは、Caenorhabditis elegansの腸透過性に対する細菌および化学物質の影響を測定するLe et alからの抜粋です。(2019). 化学物質(DIM)がP.エルギノーサを有するC.エレガンスの腸透過…
Representative Results
図1: C.エレガンス供給P.エルギノーザの腸透過性に対するDIMの影響.FITCデキストラン給餌なしの(A)大腸菌OP50(B)大腸菌による顕微鏡画像、(C)FITC-デキストラン給餌付きP.緑内症PAO1、および(D)P.</…
Materials
| 3,3’-diindolylmethane | Sigma | D9568 | |
| 90×15 mm Petri dishes | SPL Life Sciences, South Korea | 10090 | |
| Bactor Agar | Beckton Dickinson | REF. 214010 | |
| Formaldehyde solution | Sigma | F1635 | |
| Caenorhabditis elegans N2 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | Wild type | |
| Cholesterol | Sigma | C3045 | |
| Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene | Corning Incorporated | REF. 3631 | |
| Dimethyl sulfoxide | Sigma | D2650 | |
| Escherichia coli OP50 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | ||
| Fluorescein isothiocyanate – dextran | Sigma | FD10S | |
| Harmony software | PerkinElmer | verson 3.5 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate | Fisher Bioreagents | BP2213-1 | |
| Fluoromount aqueous mounting medium | Sigma | F4680 | |
| Operetta CLS High-Content Analysis System | PerkinElmer | HH16000000 | |
| Peptone | Merck | EMD 1.07213.1000 | |
| Pseudomonas aeruginosa PA01 | Korean Collection for Type Culture | KCTC NO. 1637 | |
| Sodium Chloride | Fisher Bioreagents | BP358-1 | |
| Stereo Microscope | Nikon, Japan | SMZ800N |
Cite This Article
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).