UV-bestråling: En metode til integrering af ekstrakromosomale arrays

Abstract

Kilde: Mariol, M.C et al. En hurtig protokol til integration af ekstrakromosomale arrays med høj transmissionshastighed i C. elegans Genome. J. Vis. Exp. (2013). 

Mikroinjektion af transgener resulterer normalt i C. elegans stammer med store ekstrakromosomale arrays, hvilket resulterer i variabelt udtryk og transmission af transgenet.  UV-bestråling kan fremkalde kromosomal integration af array og mere stabil transgene transmission.

Protocol

Denne protokol er et uddrag fra Mariol et al, en hurtig protokol til integration af ekstrakromosomale arrays med høj transmissionshastighed i C. elegans Genome, J. Vis. Exp. (2013). 1. UV-bestråling og genvinding af transgene orme Bestråling af orme: Vælg 30-100 fluoresc…

Representative Results

Tabel 1. Sammenligning af standardprotokollerne og forbedrede protokoller for integration af ekstrakromosomale arrays iC. elegans-genomet. To ikke-integrerede transgener, der transmitterede med omtrent samme frekvens, blev integreret ved hjælp af standarden eller den forbedrede protokol. Den største forskel ligger i det faktum, at der i standardprotokollen udf?…

Materials

U.V. cross-linker	Fischer Scientific		Wavelength 254 nm
Microscope SteREO Discovery V8	Carl Zeiss, Inc.
Petri dishes, 60 mm	CML	BPS55E6
Platinium wire 0.25 mm	Alfa Aesar	6/4/7440	To make a pick for worms