UV-Bestrahlung: Eine Methode zur Integration extrachromosomaler Arrays

Abstract

Quelle: Mariol, M.C et al. Ein schnelles Protokoll zur Integration von extrachromosomalen Arrays mit hoher Übertragungsrate in das C. elegans Genome. J. Vis. (2013). 

Die Mikroinjektion von Transgenen führt in der Regel zu C. elegans-Stämmen mit großen extrachromosomalen Arrays, die zu variabler Expression und Transmission des Transgens führen.  UV-Bestrahlung kann eine chromosomale Integration des Arrays und eine stabilere Transgenübertragung induzieren.

Protocol

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Mariol et al, A Rapid Protocol for Integrating Extrachromosomal Arrays With High Transmission Rate into the C. elegans Genome, J. Vis. Exp. (2013). 1. UV-Bestrahlung und Rückgewinnung von transgenen Würmern Wurmbestrahlung: Wählen Sie 3…

Representative Results

Tabelle 1. Vergleich der Standard- und verbesserten Protokolle für die Integration extrachromosomaler Arrays in dasGenom vonC. elegans. Zwei nicht integrierte Transgene, die mit ungefähr der gleichen Frequenz übertragen, wurden mit dem Standard oder dem verbesserten Protokoll integriert. Der Hauptunterschied besteht darin, dass im Standardprotokoll ein Bildsch…

Materials

U.V. cross-linker	Fischer Scientific		Wavelength 254 nm
Microscope SteREO Discovery V8	Carl Zeiss, Inc.
Petri dishes, 60 mm	CML	BPS55E6
Platinium wire 0.25 mm	Alfa Aesar	6/4/7440	To make a pick for worms