定向脑深部结构与配送药品，病毒载体，或细胞移植Microinjections
Summary
在这篇文章中，我们将展示一种方法，使与50微米的管腔玻璃毛细管针。这种技术大大降低大脑的损害，最大限度地减少药物的被动扩散，并允许一个精确的定位到啮齿类动物的大脑。
Abstract
进入脑实质Microinjections很重要的程序，以提供药物，病毒载体或细胞移植。注射针，在其运动轨迹会产生脑部病变是一个主要关注的不仅是大脑小，而且有时需要多次注射，特别是在老鼠大脑。我们在这里展示的方法，以生产50微米管腔，从而显着降低脑损伤，并允许一个精确的定位到啮齿类动物的大脑的玻璃毛细管针。此方法允许小卷交货（从20到100 NL），减少了出血的风险，并最大限度地减少药物进入脑实质的被动扩散。通过使用不同大小的毛细玻璃管，或改变针管腔，几种类型的物质和细胞可以被注入。用玻璃毛细管Microinjections代表在注射技术和针对最小的附带损害小老鼠的脑深部的一个显着的改善。
Protocol
鼠标手术前的玻璃针： 放置在一个微量拉马的毛细玻璃管。 热中间的玻璃管，玻璃管软化局部区域。 由最初的距离，足以导致减少在玻璃管的直径在局部区域，沿其纵轴拉伸玻璃管。 保持伸展的玻璃管，直至其断裂。这样，两个相同的单管针头。 放在microforge一个玻璃针。 30 °角是足够的锥尖。 在显微镜下检查，每针具有正确的内径。对于大?…
Discussion
显示在这个视频的方法是非常有用的提供非常精确地进入大脑的药物或病毒载体最。这项技术的主要优势是可靠性的目标来看，注射的准确性和体积小的脑损伤和束损害1，2，5，6 。一旦该技术是标准化的误炸范围50微米或小于1，2。细胞移植也可以通过使用更宽，100-150微米7-9，针。因此提供高效电池可存放到非常具体的病灶尽量减少抵押细胞移植引起的损伤。在这项技术…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
OG – P是由国家科学技术委员会授予小号（CB – 2008 – 101476）和FRABA（一十分之六百八十六）支持。 AQ – H的支持由美国国立卫生研究所，霍华德休斯医学研究所，罗伯特伍德约翰逊基金会和马里兰州干细胞基金会。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Capillary glass tube | Wiretrol I | 5-000-1001 | ||
| Micropipette puller | Kopf | Model 730 | ||
| Microforge | World Precision Instruments | Model 48000 | ||
| Mineral oil | MSDS | M7700 | ||
| High-vacuum grease | Dow Corning | 05054-AB | ||
| Anesthesia: 2.5% Avertin | 2,2,2-tribromoethanol + tert-amyl alcohol, 1:1 w/v | |||
| Heater pad | Mastex | Model 900 | ||
| Stereotactic device | Kopf | Model Kopf-900 | ||
| Surgical scalpel blade # 15 | Medi-Cut | |||
| Micro driller | Ideal Micro Drill | 67-1000 | ||
| Fine forceps | Fine Scientific Tools | |||
| 1-μL Micropipette | Rainin | |||
| Parafilm M. | ||||
| Surgical microscope | Zeiss | Vasiorkop with Contraves system | ||
| Microinjector | Narishige | Model MO-10 |
References
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Cite This Article
Gonzalez-Perez, O., Guerrero-Cazares, H., Quiñones-Hinojosa, A. Targeting of Deep Brain Structures with Microinjections for Delivery of Drugs, Viral Vectors, or Cell Transplants. J. Vis. Exp. (46), e2082, doi:10.3791/2082 (2010).