鼠标垂体免疫原的制备诱导实验性自身免疫性垂体炎
Summary
可以复制自身免疫性垂体炎在小鼠体内，小鼠垂体蛋白提取物注射。
Abstract
自身免疫性垂体炎是一种慢性炎症引起或伴随着自身免疫 1的脑下垂体。它历来被认为是一种罕见的疾病，但报告已在近年来显着增加。垂体炎，事实上，发展不寻常在块上，如CTLA – 4和PD – 1受体的T淋巴细胞，表达抑制性受体与抗体治疗癌症患者的一个“副作用“。实验小鼠注射佐剂3混合垂体蛋白质可诱发自身免疫性垂体炎。在这个视频文章中，我们演示了如何从鼠标脑垂体和如何准备他们在适合SJL小鼠诱导的自身免疫性垂体炎的形式提取的蛋白质。
Protocol
实验协议在这个试验性的协议的第一步是收集了大量鼠标脑垂体。第二个步骤是，同质化的腺体准备蛋白提取物。第三步是油性混合物乳化这些蛋白质。 第1步：鼠标脑垂体收集和储存鼠标脑下垂体位于颅底三叉神经和视交叉前方横向包围，在所谓蝶鞍蝶骨的抑郁症。腺体组成一个较大的前叶和较小的后部和中间叶，体重平均为1.9毫克。…
Discussion
尽管自身免疫性垂体炎的第一个病人是在1962 年第4期报道，垂体自身抗原的致病性仍有待确定5。动物模型是非常有用的，以确定这些自身抗原的，协助的生物标志物，是可翻译的病人护理的发现。本文演示了一个简单的程序，准备在垂体蛋白质的形式，在实验动物诱发自身免疫性垂体炎是足够的。
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作是由美国国立卫生研究院授予DK080351 PC支持。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 15-ml Falcon tubes | ||||
| homogenization buffer | ||||
| phosphate buffered saline | ||||
| protease inhibitor cocktail | ||||
| Polytron homogenizer | ||||
| BCA assay | Pierce | 23225 | ||
| Complete Freund’s Adjuvant (CFA) | Sigma | F-5881 | ||
| Mycobacterium tuberculosis | Becton Dickinson | 231141 | ||
| 2.5 mL Hamilton gastight syringe | ||||
| 22-gauge micro-emulsifying needle |
References
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Cite This Article
Tzou, S., Landek-Salgado, M. A., Kimura, H., Caturegli, P. Preparation of Mouse Pituitary Immunogen for the Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis. J. Vis. Exp. (46), e2181, doi:10.3791/2181 (2010).