Un test organotypique à haute résolution imagerie time-lapse de la migration neuronale dans le cerveau postnatal
Summary
Ce protocole décrit une analyse organotypique optimisé pour le cerveau postnatal et à haute résolution imagerie time-lapse de la migration des neuroblastes dans le flux rostrale migrateurs.
Abstract
Neurogenèse dans le cerveau postnatal dépend du maintien de trois événements biologiques: la prolifération des cellules progénitrices, la migration des neuroblastes, ainsi que la différenciation et l'intégration de nouveaux neurones dans les circuits neuronaux existants. Pour neurogenèse postnatale dans les bulbes olfactifs, ces événements sont séparés dans les trois domaines anatomiquement distincts: la prolifération se produit essentiellement dans la zone sous épendymaire (ZES) des ventricules latéraux, la migration des neuroblastes parcourir à travers le flux migratoire rostral (RMS), et de nouveaux neurones se différencier et intégrer dans les bulbes olfactifs (OB). Les trois domaines servent de plateformes idéales pour étudier les mécanismes cellulaires, moléculaires et physiologiques qui régulent chacun des événements biologiques distinctement. Ce document décrit un essai organotypique optimisé pour les tissus du cerveau après la naissance, dans lequel les conditions extracellulaires imitent l'environnement in vivo pour la migration des neuroblastes. Nous montrons que notre test fournit pour le mouvement uniforme, orienté et rapide des neuroblastes dans le RMS. Ce test sera très approprié pour l'étude de la régulation des cellules autonomes et non autonomes de la migration neuronale en utilisant des approches inter-greffe de la souris sur les différents fonds génétiques.
Protocol
Discussion
La migration neuronale dans le RMS est une composante essentielle de la neurogenèse postnatale dans les bulbes olfactifs 1. La migration à travers le RMS se produit dans un plan tangentiel à la surface du cerveau. Neuroblastes migrent tangentiellement sont distinctes de la migration des cellules radialement basés sur la localisation de leur source progénitrices, ainsi que le sort de leurs divergences produits finis neuronale 1, 2, 3. La population est relativement pure de cellules migrent tang…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous tenons à remercier Dan McWhorter pour raconter le protocole dans la vidéo. Ce travail est soutenu par des subventions du NIH 5R01NS062182, une subvention de la Fédération américaine pour la recherche sur le vieillissement, et les fonds institutionnels attribué à HTG.
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