Detta protokoll beskriver en organotypic slice analys optimerad för den postnatala hjärnan och högupplösta tidsförlopp avbildning av neuroblast migrationen i rostralt flyttande strömmen.
Neurogenes i den postnatala hjärnan beror på underhåll av tre biologiska händelser: spridning av progenitorceller, migration av neuroblaster samt differentiering och integration av nya nervceller i existerande neurala kretsar. För postnatal neurogenes i lukt lökar, är dessa händelser segregerade inom tre anatomiskt skilda områden: spridning till stor del sker i subependymala zon (SEZ) i den laterala ventriklarna, vandrar neuroblaster passera genom rostralt vandrande ström (RMS), och nya nervceller differentiera och integreras inom luktsinnet lökar (OB). De tre områden utgör idealiska plattformar för att studera de cellulära, molekylära och fysiologiska mekanismer som reglerar vart och ett av biologiska händelser tydligt. Detta dokument beskriver en organotypic slice analys optimerad för postnatal hjärnvävnad, där den extracellulära villkoren noga efterlikna in vivo-miljö för flyttande neuroblaster. Vi visar att vår analys ger enhetlig, orienterad, och snabb förflyttning av neuroblaster inom RMS. Denna analys kommer att vara mycket lämplig för studier av cellens autonoma och icke-självständiga reglering av neuronala migreringen genom att använda cross-transplantation metoder från möss på olika genetiska bakgrunder.
Neuronala migration i RMS är en viktig del av postnatal neurogenes i luktsinnet lökar 1. Migration genom RMS sker i ett plan som tangerar ytan av hjärnan. Tangentiellt migrera neuroblaster skiljer sig från radiellt migrera celler baserat på lokaliseringen av deras stamceller källa, liksom de skiljaktiga öde deras slutliga neuronala produkterna 1, 2, 3. Den relativt rena befolkning tangentiellt vandrar celler under den postnatala RMS gör detta anatomiskt definierbara regionen en optimal plat…
The authors have nothing to disclose.
Vi tackar Dan McWhorter för berätta protokollet i videon. Detta arbete stöds av NIH Grant 5R01NS062182, ett bidrag från American Federation för Aging Research, och institutionella medel som beviljats HTG.