Summary

Basada en sondeos endomicroscopía Láser Confocal del tracto urinario: la técnica

Published: January 10, 2013
doi:

Summary

Basada en sondeos endomicroscopía láser confocal permite en tiempo real de la microscopía del tracto urinario humano durante la cistoscopia, proporcionando imágenes dinámicas, intravital de estados patológicos como el cáncer de vejiga con resolución celular. Endomicroscopía puede aumentar la precisión diagnóstica de la endoscopia estándar de luz blanca y proporcionar orientación intraoperatoria en la imagen para mejorar la resección quirúrgica.

Abstract

Sonda basada en láser confocal endomicroscopía (CLE) es una tecnología emergente que permite formación de imágenes ópticas en tiempo real de microscopía in vivo de las superficies mucosas durante la endoscopia estándar. Con las aplicaciones actualmente en los tractos respiratorio y gastrointestinal 1, 2-6 CLE también se ha explorado en el tracto urinario para el diagnóstico de cáncer de vejiga. 7-10 morfología celular y la microarquitectura del tejido se puede resolver con la resolución escala del micrón en tiempo real, además de formación de imágenes dinámica de la vasculatura normal y patológica. 7

La sonda basada en CLE sistema (Cellvizio, Mauna Kea Technologies, Francia) consiste en una sonda de imagen reutilizable fibra óptica acoplada a una unidad de exploración de 488 nm láser. La sonda de imagen se inserta en los canales de trabajo de estándar endoscopios flexibles y rígidos. Un endoscopio basado CLE sistema (Optiscan, Australia), en la que el functionalit endomicroscopía confocaly está integrado en el endoscopio, se utiliza también en el tracto gastrointestinal. Dado el diámetro mayor alcance, sin embargo, la aplicación en el tracto urinario se limita actualmente al uso ex vivo. 11 de adquisición de imagen confocal se realiza a través del contacto directo de la sonda de imagen, con el tejido diana y se registró como secuencias de vídeo. Como en el tracto gastrointestinal, endomicroscopía del tracto urinario requiere un agente de contraste exogenenous-más comúnmente fluoresceína, que se puede administrar por vía intravenosa o por vía intravesical. Administración intravesical es un método bien establecido para introducir agentes farmacológicos localmente con toxicidad sistémica mínima que es única para el tracto urinario. Fluoresceína rápidamente las manchas de la matriz extracelular y tiene un perfil de seguridad establecido. 12 sondas de imagen de varios diámetros permitir la compatibilidad con endoscopios de diferentes calibres. Hasta la fecha, 1,4 y 2,6 mm sondas han sido evaluadas con flexible y ricistoscopia gid. disponibilidad reciente de 10 a <1 mm Sonda de imágenes 13 abre la posibilidad de CLE en el tracto urinario superior durante la ureteroscopia. Fluorescencia cistoscopia (diagnóstico fotodinámico es decir) y las imágenes de banda estrecha son adicionales basados ​​endoscopio modalidades de imágenes ópticas 14 que se pueden combinar con CLE para lograr imágenes multimodal del tracto urinario. En el futuro, CLE se puede acoplar con agentes de contraste molecular tales como péptidos marcados con fluorescencia 15 y anticuerpos para la obtención de imágenes endoscópicas de los procesos de enfermedad con especificidad molecular.

Protocol

1. Preparación del paciente El consentimiento del paciente programado para la cistoscopia diagnóstica y otros procedimientos endourológicas como la resección transuretral de tumor vesical (RTU) para el CLE. Incluir en el consentimiento una descripción del uso de fluoresceína intravesical y / o intravenosa como el agente de contraste. Investigar la historia de reacción de hipersensibilidad a la fluoresceína. El paciente es colocado para la cistoscopia (típicamente en posición de litotomía)…

Representative Results

CLE imágenes se guardan como archivos de vídeo en escala de grises en la secuencia de 12 cuadros por segundo. Interpretación de las imágenes se realiza en tiempo real y puede ser utilizado para impactar toma de decisiones clínicas en virtud de un protocolo de investigación. Análisis fuera de línea, que incluye la revisión de la secuencia de vídeo, el procesamiento de imágenes adicionales, tales como mosaicos, 7 y la comparación con el estándar de patología, son importantes durante la fase de cur…

Discussion

Lograr y mantener un contacto sólido entre la cara en la sonda de imagen y la mucosa de la vejiga es el paso más crítico en la adquisición de una calidad de imagen óptima. Hay aproximadamente una curva paciente 3-5 aprendizaje para desarrollar la destreza para manipular la sonda de imagen y de mantener la sonda estable durante la adquisición de imagen. Además, ya que este procedimiento se lleva a cabo in vivo, los movimientos del paciente (es decir, respiratorio) y pulsaciones vasculare…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Los autores desean agradecer a Mauna Kea Technologies para obtener asistencia técnica. Los autores también agradecen a Shelly Hsiao para la asistencia técnica y Kathleen E. Mach para su examen crítico. Este trabajo fue apoyado en parte por el NIH R01CA160986 a JCL

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
Cellvizio 100 Series Mauna Kea Technologies 100 Series Includes confocal processor and LSU: F400-v2 at 488 nm
Cellvizio Confocal Miniprobe Mauna Kea Technologies Gastroflex UHD
AK-FLUOR 10% Akorn, Inc. NDC 17478-253-10

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Cite This Article
Chang, T. C., Liu, J., Liao, J. C. Probe-based Confocal Laser Endomicroscopy of the Urinary Tract: The Technique. J. Vis. Exp. (71), e4409, doi:10.3791/4409 (2013).

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