5/6th联合切除术，高盐饮食和一氧化氮合酶抑制剂诱导Lewis大鼠慢性肾脏病
Summary
两阶段方法建立Lewis大鼠慢性肾脏病（CKD），通过手术取出肾质量5/6th描述。结合的外科手术过程中，一氧化氮合酶抑制和高盐饮食导致类似人类的CKD的模型，允许因果机制的研究和发展新的治疗干预。
Abstract
慢性肾脏病（CKD）是一个全球性的问题。 CKD进展缓慢是一个主要的健康优先。由于慢性肾脏病的特点是复杂的动态平衡紊乱，综合性的动物模型是必需的研究开发和CKD恶化。要研究开发在CKD CKD和新的治疗干预，使用5/6th切除术，消融模型，一个众所周知的实验模型，进行性肾疾病，类似人类CKD的几个方面。肾质量的毛利减少，导致渐进性肾小球和肾小管间质损伤，损失残肾和发展的系统性和肾小球内高压。它也与渐进肾内毛细管损失，炎症和肾小球硬化。 CKD总是危险因素对血管内皮功能的影响。为了模仿这一点，我们结合5/6th去除肾质量与一氧化氮（NO）的枯竭和高盐饮食。抵达和驯化后，动物重新ceive一氧化氮合酶抑制剂（NG-硝基-L-精氨酸）（L-NNA）补充饮用水（20毫克/升），一个为期4周，随后右侧单侧肾切除。一个星期后，一个肾切除（SNX）的左侧。 SNX后，动物被允许恢复两天LNNA饮用水中（20毫克/升）为进一步为期4周其次。高盐饮食（6％），辅以地面州城（见时间线图1），继续在整个实验过程。通过测量血浆尿素，收缩压和蛋白尿，肾功能衰竭的进度之后随着时间的推移。通过SNX 6周后，肾功能衰竭发展。使用'黄金标准'菊粉和对氨基马尿酸（PAH）的间隙技术测定肾功能。这种模式的特点是CKD的减少，肾小球滤过率（GFR）和有效肾血浆流量（ERPF），高血压（收缩压> 150毫米汞柱），蛋白尿（> 50毫克小时）和轻度尿毒症（> 10毫米）。组织学特征包括炎症，肾小管萎缩，纤维化和局灶性肾小球硬化，导致残余人口健康肾小球内大量减少（<10％）反映了肾小管间质损害。后续SNX显示，直到12周后进一步CKD恶化。
Introduction
由于CKD的先进性，随后终末期肾脏疾病及相关心血管疾病的发病率和死亡率，是一个日益严重的公共卫生问题 。 CKD进展缓慢是一个主要的健康优先。由于慢性肾脏病的特点是复杂的动态平衡紊乱，综合性的动物模型是必需的研究开发和CKD恶化。肾脏由范围广泛的不同类型的细胞，彼此交互。这种复杂性，不能在体外模仿。
要研究新的治疗干预CKD中，我们使用的5/6th切除术烧蚀模型，一个著名的实验模型，进行性肾疾病，类似几个方面的人CKD 2,3。肾质量的毛利减少，导致渐进性肾小球和肾小管间质损伤，损失残肾和发展的系统性和肾小球内高压。这是与程序控制essive肾内毛细血管亏损4，炎症和肾小球硬化。危险因素CKD不约而同地影响内皮功能5。我们使用大鼠株（刘易斯），是比较耐CKD发展，因此，我们结合5/6th去除肾质量与一氧化氮（NO）枯竭6，7，8，高盐饮食9。抵达和驯化后，动物收到一氧化氮合酶抑制剂（L-NNA）一个为期4周的补充饮用水（20毫克/升），其次为右侧单侧肾切除（UNX）延续L-NNA两天后。一个星期后，在左侧肾切除（SNX）， 即去除肾质量分之二。 SNX后，动物被允许恢复为2天，然后再由20 mg / L的LNNA饮用水中的4个星期为一个周期。高盐饮食（6％），辅以地面州城（见时间线图1），继续在整个实验过程。 Ť他理由进行UNX的右侧，并在左侧的SNX是，肾血管长度的左侧，这使得它更易于访问未经拉伸的船只太多时身体外面的露出肾脏的肾。在文献中，模型是描述了其中的磁极的左肾首先被清除，UNX的右肾一个星期后10,11,12。在我们的手中，这个模型显示出更快速的发展，肾功能衰竭，也有更大的变化，肾功能丧失。通过测量血浆尿素，收缩压和蛋白尿，肾功能衰竭的进度之后随着时间的推移。通过SNX 6周后，肾功能衰竭发展，其特征在于由肾小球滤过率显着减少（69％）和有效肾血浆流量（62％）13高压（收缩压> 150毫米汞柱），蛋白尿（> 50毫克小时），轻度尿毒症（> 10毫米）。病理特征包括tubul的邻间质损害反映炎症，肾小管萎缩，纤维化和局灶性肾小球硬化，导致残余人口健康肾小球内大量减少（<10％）。 SNX显示随访，直到12周后进一步CKD进展，评价治疗干预的机会提供了一个窗口。
Protocol
Representative Results
Discussion
手术切除5/6th Lewis大鼠肾的质量，再加上高盐饮食和临时NOS抑制剂导致的模型类似于人类CKD CKD，CKD的治疗干预的因果机制和疗效，并允许研究。
的5/6th肾切除模型是一个著名的和广泛的描述模型，用于CKD。然而，简单地删除5/6th肾质量不会导致立即肾功能衰竭大鼠品系。我们使用Lewis大鼠的影响进行研究基于细胞的疗法，在CKD的可用性GFP + Lewis大鼠21允许nonGFP跟踪管理?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们感谢克丽斯塔：书房Ouden为她出色的技术援助。这项技术是由荷兰肾脏基金会，授予C06.2174财政支持。支持MCV是由荷兰科学研究组织（NWO）VIDI补助016.096.359。
Materials
| Reagent | |||
| L-NNA | Sigma-aldrich | N5501 | |
| Spongostan dental: gel foam pads 1x1x1 cm | Johnson&Johnson | Ms0005 | |
| Ethicon Vicryl FS-2S naald 4/0 V392H p/36 | Ethicon | V303H | |
| Ethicon Vicryl RB-1+ naald 5/0 V303H p/36 | Ethicon | V392H | |
| Buprenorphine (0.3 mg/ml) | Via local pharmacist ordered by Reckitt Benckiser pharmaceuticals | unknown | |
| Equipment | |||
| Student Tissue Forceps – 1×2 Teeth 12 cm | Fine Science Tools (FST) | 91121-12 | |
| Student Standard Pattern Forceps | FST | 91100-12 | |
| Mayo Scissors | FST | 14010-15 | |
| 2X Semken Forceps | FST | 11008-13 | |
| Student Iris Scissors | FST | 91460-11 | |
| Olsen-Hegar Needle Holder | FST | 12002-14 |
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