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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Plasmid Purification
  • 00:00Overview
  • 00:44Principal Components of the Plasmid Purification Procedure
  • 02:25Plasmid Purification Procedure: Step by Step
  • 05:53Applications
  • 07:51Summary

质粒纯化

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Overview

质粒纯化是将质粒DNA与基因组DNA、蛋白质、核糖体以及细菌细胞壁分离开的一种技术。质粒是小的环状双链DNA,用作特定DNA分子的载体。当质粒通过转化技术导入宿主细胞后,将被复制产生大量拷贝的DNA片段用于研究。

本短片讲述了常用的质粒纯化的逐步过程。质粒纯化包括三个基本步骤:细菌的培养,细菌的收集和裂解,质粒DNA的纯化。视频还解释了操作过程每一步中质粒在哪里会被发现,以及如何用分光光度计和电泳对质粒进行定量和纯度的分析。目前有多种质粒纯化的方法,可以根据所需质粒的产量,质粒的拷贝数目和细菌培养的体积来进行选择。

Procedure

质粒是独立于染色体的环状DNA分子。在分子生物学中,他们被用作运送分子,或称载体,用于承载特定的DNA片段。利用细菌来复制质粒,可以大规模生产目的DNA。这个被研究人员用来从细菌中获得质粒的方法称为质粒纯化,将在本短片中得到讲解。 质粒纯化当然是指纯化质粒,但这具体是什么意思呢?要纯化质粒就是将质粒从细菌的染色体、蛋白质、细菌胞膜和细菌核糖…

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No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Plasmid Purification. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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