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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Plasmid Purification
  • 00:00Overview
  • 00:44Principal Components of the Plasmid Purification Procedure
  • 02:25Plasmid Purification Procedure: Step by Step
  • 05:53Applications
  • 07:51Summary

プラスミドの精製

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Overview

プラスミドの精製はゲノムDNA、タンパク質、リボソーム、バクテリアの細胞壁を取り除き、プラスミドDNAを単離する手法です。プラスミドは小さい環状の二本鎖DNAであり、特異的DNA分子の担体として利用されます。形質転換により宿主生物に導入されたプラスミドは複製されて多数のDNA断片コピーを得ることができ、研究に広く利用されています。

このビデオでは、プラスミド精製の一般的な手技を紹介しています。プラスミドを精製するための3つの基本ステップ: バクテリアの培養による増殖、バクテリアの回収と溶解、そしてプラスミドDNAの精製、があります。このビデオでは、プラスミドがどのような過程を経て精製されていくのかを各工程を追いながら説明し、また分光器やゲル電気泳動を用いたプラスミドDNAの質と量の分析方法を紹介しています。そして目的の量、プラスミドのコピー数、バクテリアの培養液量に応じた様々なプラスミドの精製方法も紹介しています。

Procedure

プラスミドとは環状の過剰染色体DNA分子であり、分子生物学では特異的なDNA断片の担体もしくはベクターとして利用されます。バクテリアはプラスミド複製のために利用され、目的のDNAを大量生産できます。バクテリアからプラスミドを回収する手法をプラスミドの精製と呼び、これからこの手法について説明していきます。 プラスミドの精製とはプラスミドを純正…

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Plasmid Purification. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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