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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Plasmid Purification
  • 00:00Overview
  • 00:44Principal Components of the Plasmid Purification Procedure
  • 02:25Plasmid Purification Procedure: Step by Step
  • 05:53Applications
  • 07:51Summary

Purificación de plásmidos

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Overview

Purificación del plásmido es una técnica utilizada para aislar y purificar ADN de plásmido de ADN genómico, las proteínas, los ribosomas y la pared celular bacteriana. Un plásmido es un pequeño, circular, doble cadena de ADN que se utiliza como transportador de moléculas de ADN específicas. Cuando se introduce en un organismo anfitrión a través de la transformación, un plásmido se replicarán, creando numerosas copias del fragmento de DNA en estudio.

En este video, se describe un procedimiento generalizado paso a paso de cómo realizar la purificación del plásmido. Purificación del plásmido incluye tres pasos básicos: crecimiento del cultivo bacteriano, cosecha y lisis de las bacterias y purificación del plásmido ADN. El video contiene una explicación donde puede encontrarse el plásmido en cada paso del protocolo y cuantitativamente y cualitativamente analizar ADN de plásmido con un espectrofotómetro o gel de electroforesis. Existen diferentes tipos de plásmido purificación los métodos disponibles, que están orientados a la producción deseada, número de copias del plásmido y volumen de cultivo bacteriano.

Procedure

Los plásmidos son moléculas de ADN extra cromosómicas, circular y en biología molecular que actúan como portadores o vectores, para un ADN específico del fragmento. Las bacterias se utilizan para replicar plásmidos, por lo que el ADN de interés es producido en masa. El proceso por el cual los investigadores obtención plásmidos de bacterias se denomina purificación del plásmido, que se explica en este video. Obviamente, implica la purificación del plásmido purifica…

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No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Plasmid Purification. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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