Generatie van de CAR T-cellen voor adoptieve Therapie in de context van glioblastoma Standard of Care

Katherine Riccione; Carter M. Suryadevara; David Snyder; Xiuyu Cui; John H. Sampson; Luis Sanchez-Perez

doi:10.3791/52397

Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Generatie van de CAR T-cellen voor adoptieve Therapie in de context van glioblastoma Standard of Care

20.2K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/52397

⸱

16 februari 2015

Katherine Riccione¹^,² , Carter M. Suryadevara¹^,³ , David Snyder¹ , Xiuyu Cui¹ , John H. Sampson¹^,²^,³ , Luis Sanchez-Perez¹

¹Duke Brain Tumor Immunotherapy Program, Department of Neurosurgery, Duke University, ²Department of Biomedical Engineering, Duke University, ³Department of Pathology, Duke University

In dit artikel

Samenvatting

De lymfodeletieve en immunomodulerende effecten van chemotherapie en stralingsstandaardzorg kunnen worden benut om de antitumor-effectiviteit van T-celimmunotherapie te verbeteren. We schetsen een methode voor het genereren van EGFRvIII-specifieke chimere antigeenreceptor (CAR) T-cellen en het toedienen ervan in de context van glioblastoma standaardzorg.

Samenvatting

Adoptieve T-cel immunotherapie biedt een veelbelovende strategie voor het specifiek targeten en elimineren van kwaadaardige glioma's. T-cellen kunnen ex vivo worden gemodificeerd om chimere antigeenreceptoren te gaan uitdrukken die specifiek zijn voor glioma-antigenen (CAR T-cellen). De expansie en functie van adoptief overgedragen CAR T-cellen kan worden versterkt door de lymfodeletieve en tumordodende effecten van standaard chemotherapie en radiotherapie. We beschrijven een methode voor het genereren van CAR T-cellen die EGFRvIII targeten, een glioma-specifiek antigeen, en evalueren hun effectiviteit in combinatie met een muismodel van glioblastoma standaard behandeling. T-cellen worden gemodificeerd door middel van transductie met een retrovirale vector die het anti-EGFRvIII CAR-gen bevat. Diermodellen met tumoren worden onderworpen aan hostconditionering door een kuur van temozolomide en bestraling van de hele hersenen met dosisregimes die zijn ontworpen om de klinische standaardbehandeling te modelleren. CAR T-cellen worden vervolgens intraveneus toegediend aan geprimeerde gastheren. Deze methode kan worden gebruikt om de antitumoreffectiviteit van CAR T-cellen te evalueren in de context van standaard behandeling.

Inleiding

Glioblastoom (GBM) is de meest voorkomende primaire kwaadaardige hersentumor en is altijd fataal. Chirurgische resectie gekoppeld aan aspecifieke zorgstandaard chemotherapie en radiotherapie niet volledig te elimineren kwaadaardige cellen, resulterend in een sombere prognose van minder dan 15 maanden bij patiënten met deze ziekte ^1. Daarentegen immunotherapie biedt een nauwkeurige benadering specifiek richten op tumorcellen, en heeft dus de potentie om te dienen als een zeer effectieve behandeling platform met verminderd risico van toxiciteit zekerheden ^2-4. T-cellen ontwikkeld ex vivo te uiten chimeer antigen receptoren (auto's) bi....