Summary

자궁 원격 측정은 마우스 수축 압력을 측정하는<em> 생체</em

Published: April 06, 2015
doi:

Summary

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

Abstract

분자 및 전기 신호의 복잡한 통합 임신의 단부에 수축 기관에 무부하 자궁 변환하는데 필요하다. 자궁 수축의 핵심 규제의 발견에도 불구하고,이 과정은 아직 완전히 이해되지 않습니다. 형질 전환 마우스는 출산을 연구하기에 이상적인 모델을 제공합니다. 이전에는 마우스의 자궁 수축을 연구 할 수있는 유일한 방법은 여러 가지 이유로 최적입니다 생체 아이소 메트릭 장력 기록했다. 자궁이 생리 학적 환경에서 제거해야합니다, 조사의 제한된 시간 코스가 가능하며, 마우스를 희생해야합니다. 방사성 원격 측정 최근 개발은 마우스에서 생체 내 자궁 내 압력의 길이, 실시간 측정을 허용했다. 배달 설명 될 때까지 여기, 자궁 텔레의 주입은 임신 중기에서 마우스 자궁의 압력 변화를 측정합니다. 언론의 비교 차이로야생형 및 트랜스 제닉 마우스는 간을 실시해, 관심 유전자의 생리적 영향이 설명 될 수있다. 이 기술은 조산을 포함한 임신 중 자궁 근 장애를 치료하는 데 사용되는 치료제의 개발을 촉진한다.

Introduction

조산은 주 산기 이환율과 선진국에서 사망의 주요 원인이다 그것은 주 산기 사망률의 50 % 및 주 산기 사망률 1, 2의 75 %에 대한 책임이 있습니다. 조기 진통은 다각적이고 특발성 수 있습니다. 많은 연구가 수축 하나에 대기 조직의 근육층을 변환 분자 및 전기 경로에 등장했지만, 조산의 정확한 병태 생리는 애매 남아있다. 내분비, 염증, 및 유전자 조절은 모든 조산 3,4에 연결되어있다. 그러나 윤리적 인 문제는 인간의 조산의 메커니즘에 대한 연구를 수행하는 능력을 제한한다.

이러한 한계를 감안할 때, 많은 연구자들은 분만의 생리를 연구하는과 모델 시스템으로 마우스에 설정되어있다. 마우스는 짧은 임신 기간은 약 3 주 지속하고 쉽게 유 전적으로 조작 할 수있다. 또한, 다수의 유전자 마우스 모델은 할노동 5에 필수적인 신호 전달 경로를 결정하기 위해 개발되었다. 마우스와 인간의 출산 사이의 키 차이에도 불구하고, 마우스와 인간은 자궁 내 염증과 감염 (6)를 포함하여 노동에 필수적인 같은 메커니즘의 많은 것을 공유 할 수 있습니다. 따라서, 마우스는 자궁의 활동을 조사하기위한 매우 중요한 도구 역할을한다. 현재까지, 황금 표준이 생쥐의 자궁 수축력을 측정하는 것은 생체 아이소 메트릭 장력 기록하고있다; 그러나, 이것은 실험 당 하나 임신성 시점 제한되며 생리적 환경에서 자궁을 제거를 필요로한다. 또 다른 중요한 요소는이 조사에 필요한 동물의 다수이다. 마지막으로,이 방법은 노동과 조기 병태 생리의 유도를 검토 종 연구를 허용하지 않습니다.

동맥 압력을 연구하는 데 사용 방사성 동위 원소 원격 측정 장치에 대한 최근의 발전 마우스와 INT 7 변경쥐 8 rauterine 압력이 같은 기술은 임신 중에 생쥐의 자궁 내 압력의 변화를 연구하는 데 사용할 수 있는지 여부에 대한 질문을 구걸했다. 초기 문제 후, 방법은 성공적 마우스에서 유도 분만과 진행을 측정하기 위해 개발되었다. 이 방법은 생체 내 강제 노동 수축 나타내는 고압 상태로 무부하 자궁 저압 상태로부터 천이를 측정 할 수있다. 이 방법은 유전자 발현 (9)의 생리적 영향을 보여주는 손상 분만 및 야생형 마우스와 트랜스 제닉 마우스 사이에 상당한 압력 차이를 감지 할 수있다. 이 프로토콜은 임신 중에 마우스 자궁 압력을 연구하는 생체 방법, 실시간을 제공합니다.

Protocol

참고 : 국립 보건원 (National Institutes of Health)에서 정한 동물의 관리 및 사용에 대한 가이드 라인을 준수 모든 동물 절차. 모든 프로토콜은 세인트 루이스에있는 워싱턴 대학의 동물 연구위원회에 의해 승인되었다. 참고 :이 프로토콜에 대한 특정 재료 및 장비 재료 및 장비 테이블을 나열되어 있습니다. 여성 마우스의 1 시간 초과 사육 남성과 2 시간의 시간 창에?…

Representative Results

생체 내 자궁 내 압력 실시간 원격 측정은 수집 시스템을 이용하여 기록 될 수있다. 마우스의 동시 녹화와 짝 압력 샘플링 각 강아지의 전달의 정확한 시간을 캡처 어머니의 자궁 내 압력 배달 시간 상관 관계를 사용 하였다. 모든 데이터 포인트는 압력 – 대 – 시간 곡선 (도 1A)을 생성하는 플롯에 걸쳐 기록 될 수있다. 이 플롯은 임신 중에 점을 나타낸다 때 자궁 내 압력 ?…

Discussion

자궁 근 수축의 조사는 근육 긴장의 생체 측정에 의존하고있다. 이 방법론은 동물을 살 관리 할 수​​ 없습니다 새로 개발 된 uterotonic 약물의 초기 단계의 테스트를 위해 유용 할 수 있습니다. 길이 방향의 진행 노동을 이해하지만, 생체 내 접근법이 필요하다. 생체 측정은 여러 가지 용도로 사용. 첫째, 임신 기간 동안 자궁 수축 패턴의 변화의 완전한 그림의 캡처를 할 수 있?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Surgical Glue 3M Vetbond 1469SB Tissue Adhesive–stored in Drierite
Absorbable 6-0 Sutures Ethicon J212H Vicryl
Non-absorbable 6-0 Sutures Ethicon 8706H Prolene
Water Jacket Blanket + Heating Pad Gaymer T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC Specialized for rodents
Bead sterilizer Keller Z378577 Steri 250 Sterilizer
Disecting Microscope Nikon SMZ754 Fibre optic gooseneck external light source
Sterile Surgical Gloves–Latex  Cardinal Health Triflex 2D7253
PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter  Data Sciences International 270-0135-001 TA11PA-C10
Telemeter Reciever  Data Sciences International 272-6001-001 RPC-1
Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum  Data Sciences International 271-0147-141 Analysis software
Diet Recovery Gel Clear H2O 72-01-5022 Purified Soft Diet for Rodents
Tergazyme Sigma-Aldrich Z273287 Enzyme detergent

References

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Cite This Article
Rada, C. C., Pierce, S. L., Grotegut, C. A., England, S. K. Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo. J. Vis. Exp. (98), e52541, doi:10.3791/52541 (2015).

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