Внутриматочная телеметрии измерить мышь сократительной давления<em> В Vivo</em
Summary
This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.
Abstract
Комплекс интеграция молекулярных и электрических сигналов необходимо, чтобы превратить покоя матки в сократительной органа в конце беременности. Несмотря на открытие ключевых регуляторов матки, этот процесс до сих пор до конца не изучен. Трансгенные мыши обеспечивают идеальную модель, в которой для изучения родов. Ранее единственным способом для изучения сократимости матки, у мышей был Экс Vivo изометрические записи напряжение, которое субоптимальны по нескольким причинам. Матка должна быть удалена от его физиологической среде, в течение ограниченного времени ход исследования можно, и мышей умерщвляли необходимо. Недавнее развитие радиометрического телеметрии позволило продольных режиме реального времени измерений в естественных условиях давления внутриутробного у мышей. Здесь имплантация внутриутробного Telemeter для измерения изменения давления в матке мыши с середины беременности до родов не описано. По сравнению различий в прессеОЭС между дикого типа и трансгенных мышей, физиологический воздействие интересующего гена может быть выяснена. Этот метод следует ускорить развитие терапевтических, используемых для лечения миометрия беспорядки во время беременности, в том числе преждевременных родов.
Introduction
Преждевременные роды являются ведущей причиной перинатальной заболеваемости и смертности в развитых странах; он несет ответственность за 50% перинатальной заболеваемости и 75% перинатальной 1,2 смертности. Преждевременные роды многогранна и может быть идиопатическим. Хотя много исследований появилась на молекулярном и токопроводов, преобразующих миометрия от покоя ткани в сократительных одного, точнее патофизиологии преждевременных родов остается неуловимым. Болезни эндокринной системы, воспалительные и регуляции генов были все связаны с преждевременными родами 3,4. Тем не менее, этические соображения ограничивают возможность проводить исследования на механизмах преждевременных родов в организме человека.
Учитывая эти ограничения, многие исследователи обратились к мышам в качестве модельной системы, с которой для изучения физиологии родов. Мыши имеют короткие беременностью продолжительностью около трех недель и может быть легко генетически манипулировать. Кроме того, несколько генетические модели мыши имеютразработан для определения сигнальных путей, которые необходимы для труда 5. Несмотря на ключевых различий между мышью и человеческой родов, мыши и люди разделяют многие из тех же механизмов, которые необходимы для труда, в том числе внутриутробного воспаления и инфекции 6. Таким образом, мыши служить бесценным инструментом для изучения маточную активность. На сегодняшний день, золотой стандарт для измерения сократимости матки, у мышей был Экс Vivo изометрические записи напряженности; Однако, это ограничивается одним гестационного момент времени в эксперименте, и требуется удаление матки с его физиологической среде. Другим важным фактором является большое количество животных, необходимых для этих исследований. Наконец, эта методика не позволяет продольных исследований, посвященных индукции родов и преждевременных патофизиологии.
Последние достижения, сделанные в радиометрических устройств телеметрии, используемых для изучения артериальное давление изменяет 7 у мышей и междунарrauterine давление у крыс 8 с чем возникает вопрос, может ли такая же технология была использована для изучения изменений в внутриматочного давления у мышей во время беременности. После первоначального поиска и устранения неисправностей, метод был успешно разработан для измерения труда индукции и прогрессирования у мыши. Это, в естественных условиях подход может измерять переход из состояния низкого давления покоя матки к состоянию высокого давления, указывающий силовых родовых схваток. Этот метод также был в состоянии обнаружить существенные различия давления между трансгенных мышей с ослабленной родов и мышей дикого типа, демонстрируя физиологическую влияние экспрессии генов 9. Этот протокол обеспечивает в реальном масштабе времени, в методе естественных изучать давление мыши матки во время беременности.
Protocol
Representative Results
Discussion
Исследования миометрия сократительной полагались на бывших естественных условиях измерений напряжения мышц. Эта методика может быть полезна для ранней стадии испытаний вновь разработанных утеротонических препаратов, которые не могут быть введены в живых животных. Тем не менее,…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Surgical Glue | 3M Vetbond | 1469SB | Tissue Adhesive–stored in Drierite |
| Absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | J212H | Vicryl |
| Non-absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | 8706H | Prolene |
| Water Jacket Blanket + Heating Pad | Gaymer | T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC | Specialized for rodents |
| Bead sterilizer | Keller | Z378577 | Steri 250 Sterilizer |
| Disecting Microscope | Nikon | SMZ754 | Fibre optic gooseneck external light source |
| Sterile Surgical Gloves–Latex | Cardinal Health Triflex | 2D7253 | |
| PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter | Data Sciences International | 270-0135-001 | TA11PA-C10 |
| Telemeter Reciever | Data Sciences International | 272-6001-001 | RPC-1 |
| Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum | Data Sciences International | 271-0147-141 | Analysis software |
| Diet Recovery Gel | Clear H2O | 72-01-5022 | Purified Soft Diet for Rodents |
| Tergazyme | Sigma-Aldrich | Z273287 | Enzyme detergent |
References
- Slattery, M. M., Morrison, J. J. Preterm delivery. Lancet. 360, 1489-1497 (2002).
- Goldenberg, R. L., Culhane, J. F., Iams, J. D., Romero, R. Epidemiology and causes of preterm birth. Lancet. 371, 75-84 (2008).
- Keelan, J. A. Pharmacological inhibition of inflammatory pathways for the prevention of preterm birth. Journal Of Reproductive Immunology. 88, 176-184 (2011).
- Voltolini, C., et al. Understanding spontaneous preterm birth: from underlying mechanisms to predictive and preventive interventions. Reproductive Sciences. 20, 1274-1292 (2013).
- Ratajczak, C. K., Muglia, L. J. Insights into parturition biology from genetically altered mice. Pediatric research. 64, 581-589 (2008).
- Rajakumar, A., et al. Placental HIF-1 alpha, HIF-2 alpha, membrane and soluble VEGF receptor-1 proteins are not increased in normotensive pregnancies complicated by late-onset intrauterine growth restriction. American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 293, (2007).
- Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D’Alecy, L. G. Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American journal of physiology. Heart And Circulatory Physiology. 286, H2408-H2415 (2004).
- Mackay, L. B., Shi, L. B., Maul, H. .., Maner, W. L., Garfield, R. E. The effect of bilateral pelvic neurectomy on cervical ripening in pregnant rats. Journal Of Perinatal Medicine. 37, 263-269 (2009).
- Pierce, S. L., Kutschke, W., Cabeza, R., England, S. K. In vivo measurement of intrauterine pressure by telemetry: a new approach for studying parturition in mouse models. Physiol Genomics. 42, 310-316 (2010).
- Imamura, T., Luedke, C. E., Vogt, S. K., Muglia, L. J. Oxytocin modulates the onset of murine parturition by competing ovarian and uterine effects. American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 279, R1061-R1067 (2000).
- McCloskey, C., et al. The inwardly rectifying K+ channel KIR7.1 controls uterine excitability throughout pregnancy. EMBO Mol Med. 6 (9), 1161-1174 (2014).
